关于吖啶酯化学发光反应的特点-吖啶酯化学发光技术
1、直接化学发光,标记物为吖啶酯(雅培)或者ABEI(新产业)
2、酶促化学发光,标记物为碱性磷酸酶(厦门波生)或者辣根过氧化物酶(强生)
3、电化学发光,标记物为三联吡啶钌(罗氏)
注:括号内为代表厂家。
简介:
化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA),是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合,用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。是继放免分析、酶免分析、荧光免疫分析和时间分辨荧光免疫分析之后发展起来的一项最新免疫测定技术。
直接化学发光常用的发光剂是
吖啶酯:ā dìng。
如果吖啶环上的取代基能与吖啶环上的C-9 和H2O2形成不稳定的二氧乙烷(此二氧乙烷可迅速分解为CO2 和电子激发态的N - 甲基吖啶酮,当回到基态时发出光子),则这类取代吖啶化合物可做为化学发光标记物。
根据取代基的不同,常用作化学发光标记物的吖啶取代物分为两类:吖啶酯和吖啶磺酰胺。它们的结构中都有共同的吖啶环。
它们的发光机理相同:在碱性H2O2 溶液中,分子受到过氧化氢离子进攻时,生成不稳定的二氧乙烷,此二氧乙烷分解为CO2 和电子激发态的N - 甲基吖啶酮,当其回到基态时发出最大发射波长为430nm 的光子。
吖啶酯或吖啶磺酰胺类化合物应用于化学发光免疫分析,通常采用的体系是Acridinium ester/ H2O2 系统。
即用吖啶酯或吖啶磺酰胺标记抗体或抗原,用HNO3+ H2O2 和NaOH 作发光启动试剂。有些在发光启动试剂中加入Triton X - 100 , CTAC , Tween - 20 等表面活性剂以增强发光。
发光物吖啶酯标记的化学发光反应体系应在何种环境中进行
吖啶酯和三联吡啶钌。
吖啶酯是一类可用作化学发光标记物的化学物质,加入发光启动试剂后0.4s左右发射光强度达到最大,半衰期为0.9s左右。
三联吡啶钌其标记物的发光原理是,一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应。
发光底物吖啶酯和鲁米诺相比较而言哪个更好?
正确答案是:E.碱性或中性。
吖啶酯在碱性或中性环境(pH7~9)(E对)发生化学发光反应,其发光强度与吖啶酯及氢过氧化物浓度成正比。
吖啶酯和鲁米诺都是发光底物,但在某些方面存在差异。以下是它们之间的比较:
化学发光量子产率:吖啶酯的化学发光量子产率比鲁米诺高,这意味着使用相同量的发光剂时,吖啶酯产生的光子数更多,发光信号更强烈。
标记条件温和性:吖啶酯标记条件温和,对标记物没有明显负面影响。而鲁米诺在某些情况下可能会影响标记物的稳定性。
价格:吖啶酯的价格通常比鲁米诺高一些,这可能是因为它的制备成本相对较高。
使用范围:鲁米诺在某些检测体系中可能会产生较强的本底噪声,影响检测的灵敏度。而吖啶酯在这方面表现得更好,更适合用于一些灵敏度要求较高的检测体系。
综上所述,在某些情况下,吖啶酯可能比鲁米诺更适合作为发光底物。然而,这并不意味着鲁米诺不好。不同的发光底物适用于不同的检测体系,选择哪种发光底物需要根据具体的实验需求进行选择。武汉德晟生化建议根据不同的实验需要选购不同的发光剂。
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