盐酸水苏碱含量测定液相柱温设置-水苏碱和盐酸水苏碱

益母草为唇形科植物益母草的全草。一年或二年生草本，夏季开花。生于山野荒地、田埂、草地等。全国大部分地区均有分布。在夏季生长茂盛花未全开时采摘。 食用功效： 味辛苦、凉。活血、祛淤、调经、消水。治疗妇女月经不调，胎漏难产，胞衣不下，产后血晕，瘀血腹痛，崩中漏下，尿血、泻血，痈肿疮疡。 [编辑本段]概况 益母草为唇形科植物益母草LeonurusheterophyllusSweet. 的嫩茎叶。益母草嫩茎叶含有蛋白质、碳水化合物等多种营养成分。性味辛苦凉，具有活血、法瘀、调经、消水的功效。治月经不调、浮肿下水、尿血、泻血、痢疾、痔疾。 英文名 HERBA LEONURI 别名益母蒿、益母艾、红花艾、坤草、茺蔚、三角胡麻、四楞子棵 野麻、九塔花、山麻和九节草。 来源本品为唇形科植物益母草Leonurus japonicus Houtt. 的新鲜或干燥地上部分。鲜品春季幼苗期至初夏花前期采割；干品夏季茎叶茂盛、花未开或初开时采割，晒干，或切段晒干。 制法 鲜益母草：除去杂质，迅速洗净。 干益母草：除去杂质，迅速洗净，润透，切段，干燥。 性状 鲜益母草：幼苗期无茎，基生叶圆心形，边缘5～9浅裂，每裂片有2～3钝齿。花前期茎呈方柱形 ，上部多分枝 ，四面凹下成纵沟，长30～60cm，直径0.2～0.5cm ；表面青绿色；质鲜嫩，断面中部有髓。叶交互对生，有柄；叶片青绿色，质鲜嫩，揉之有汁；下部茎生叶掌状3 裂，上部叶羽状深裂或浅裂成3 片，裂片全缘或具少数锯齿。气微，味微苦。 干益母草：茎表面灰绿色或黄绿色；体轻，质韧，断面中部有髓。叶片灰绿色，多皱缩、破碎，易脱落。轮伞花序腋生，小花淡紫色，花萼筒状，花冠二唇形。切段者长约2cm。 鉴别 （1） 本品茎的横切面：表皮细胞外被角质层，有毛茸；腺鳞头部4、6或8 细胞，柄单细胞；非腺毛1～4细胞。下皮厚角细胞在棱角处较多。皮层为数列薄壁细胞；内皮层明显。中柱鞘纤维束微木化。韧皮部较窄。形成层不明显。木质部在棱角处较发达。髓部薄壁细胞较大。薄壁细胞含细小草酸钙针晶及小方晶。鲜品近表皮部分皮层薄壁细胞含叶绿体。 （2） 取本品粉末（鲜品干燥后粉碎）3g，加乙醇30ml，加热回流1 小时，放冷，滤过，滤液浓缩至约 5ml，加于活性炭－氧化铝柱（活性炭0.5g，中性氧化铝100～120目，2g，内径10mm）上，用乙醇30ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇0.5ml 使溶解，作为供试品溶液。另取盐酸水苏碱对照品，加乙醇制成每1ml 含5mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录Ⅵ B）试验，吸取上述两种溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇－盐酸－水（4:1:0.5） 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 药理作用 1.对子宫的作用： 益母草煎剂、酒精浸膏及所含益母草碱等对兔、猫、犬、豚鼠等多种动物的子宫均呈兴奋作用。用益母草煎剂给于兔离体子宫，无论未孕、早孕、晚期妊娠或产后子宫，均呈兴奋作用，对在位子宫，经快速静脉注射，30分钟后即出现兴奋作用，其强度与作用时间随用量加大而增长。兔子宫痿试验，用益母草煎剂 ，当子宫内加压或未加压时，均于给药15-20分钟后，使子宫呈显著的兴奋作用。益母草总碱对豚鼠离体子宫有兴奋作用，其作用类似麦角新碱。益母草水浸膏及乙醇浸膏对离体及在位子宫均有显著的兴奋作用。但对在位子宫，兴奋前先有一短时间的抑制作用，经提取后的水溶液，则无此抑制作用。对动情前期或卵巢切除后肌内注射雌二醇50mg的大鼠离体子宫，益母草碱均可使其振幅增加。益母草碱的作用与剂量有关。浓度为0.2-1mcg/ml时，剂量一张力呈线性关系，至2mcg/ml以上时达最大张力。有时可见益母草碱对自发性收缩的标本呈双向性作用，用最低有效量或突然增加浓度（超过原浓度5倍）时，在引起兴奋之前可有10-20分钟的短暂抑制。高浓度（＞20mcg/ml）因子宫肌膜的局部麻醉作用而呈现抑制作用。益母草的子宫收缩作用可持续几小时，但冲洗后可恢复。阿托品2mcg/ml不影响其收缩作用，而对兔在位子宫无作用，这是由于蒸馏法制得的益母草针剂中只含挥发油不含生物碱。益母草兴奋子宫的有效成分主要存在于叶部，根部作用很弱，茎部无效。 口服益母草水煎剂4-5次每次0.1ml（约含水提取干品50mg）。总量200-250mg，对小白鼠有一定的抗着床和抗早孕作用。 2.抗血小板聚集、凝集作用： 通过烫伤、冰水应激和静脉注射 ADP等不同方法，造成Wistar大鼠体内血小板聚集活性升高，对益母草注射液（I）在体内抗血小板聚集作用进行观察，大鼠烫伤1小时，血液血小板聚集比值下降，颈外静脉注射益母草注射液4.4ml/kg（含生药2g），能维持烫伤大鼠血小板聚集比值于正常范围。在冰水应激实验中，腹腔注射12ml/只，含生药4g，连续4天，大鼠心肌小血管血小板聚集物出现率明显减少，心肌细胞亚微结构变化亦相应改善，大鼠滴注ADP后，预注l（3ml/kg含生药6g）制剂组血液中血小板计数下降，肺泡壁毛细血管内血小板聚集物出现率均较对照组有明显改善。 益母草抗血小板聚集作用，还可通过研究益母草对血小板内cAMP、cGMP，动脉壁前列环素PGI2活性影响来证明，将益母草用酒精提取制成针剂，每1ml含生药2g，实验结果表明，对小白鼠血小板内cAMP含量明显升高（P＜0.01＝，显著抑制由ADP诱导的血小板聚集，抑制率为32%，对动脉壁PGI2样物质活性无影响，抑制率为0.6%，其作用机制可能是益母草具有抑制磷酸二酯酶活性，或通过激素起作用。 3.具有改善冠脉循环和保护心脏的作用： 益母草可促进由异丙肾上腺素造成的局部血流微循环障碍的很快恢复。异丙肾上腺素 50mg/kg，皮射制造大鼠心肌缺血坏；分别于24小时后选择T波压低和T波高的心电图，4天后选择双相T波心电图，用益母草制剂治疗，结果经治疗1小时内，大部分动物的心电图均恢复正常，显示对心肌早期缺血（24小时）甚至病变，接近缺血坏高潮期（4天），都能使冠脉循环得到改善。4%异丙肾上腺素50mg/kg 皮射，制造大鼠肠系膜微循球障碍（血瘀），微血流立即从线状变为粒线状，30分钟后，再静脉注射益母草冲剂约经1.5分钟，微血流立即从粒线状变为线状，闭锁的毛细血管重新开放，恢复正常。 静脉注射益母草制剂1ml/kg可明显增加冠脉流量，降低冠脉阻力，减慢心律及减少心输出量和右室作功的作用，动脉注射制剂120mg/（生药）/kg，能增加股动脉血流量和降低血管阻力，对血管壁有直接扩张作用。大鼠连续4天腹腔注射（2g/天），然后皮射异丙肾上腺素10mg/kg，经30分钟，观察心肌亚微结构表明，经益母草预防的10只动物，7只正常，3只轻度变化，表现为线粒体，闰盘、横管、肌浆网系统轻度肿胀，而对照组动物，4只轻度变化，6只病变明显，因此，益母草制剂对心肌超微结构，特别是线粒体有保护作用。非常明显地降低血深粘度，且有较强的升高红细胞聚集指数的作用，能纠正已失调的免疫机能恢复常态平衡。 4.对心血管的作用： 小剂量益母草碱对离体蛙心，有增强收缩作用，使用大剂量时，反呈抑制现象。这种抑制现象可能由于迷走神经末梢兴奋所致。用益母草碱进行蛙血管灌流，呈血管收缩现象，其收缩程度与所用试液浓度呈正比例。用益母草碱（2mg/kg）注射于麻醉猫的静脉，即见血压下降，数分钟后即可恢复，这种矩暂性的血压下降现象，在两侧迷走神经切断后也仍能发现，若先使用阿托品，然后注射益母草碱，血压下降即不复如前显著，故可推知益母草碱的降低血压作用不在迷走神经中抠，而可能对迷走神经末梢兴奋作用所致。 5.对呼吸中枢的作用： 益母草有直接兴奋作用，麻醉猫静脉注射益母草碱后，呼吸频率及振幅均呈显著增加，但在大剂量时，呼吸则由兴奋转入抑制，且变为微弱而不规则。在切断两侧述走神经后，仍不呼吸兴 奋作用。 6.对肠平滑肌的作用： 小量益母草碱能使兔离体肠管紧张性弛缓，振幅扩大，多量则振幅变小，而频率增加。 7.对肾脏的作用： 益母草具有治疗犬肾功能衰竭的作用。实验使用健康家犬制成急性肾功能衰竭（ARF）模型，设对照组、治疗组，用益母草针剂作为治疗药物，以肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）、滤过钠排泄分数（FENa）、肾血流量（RBF）及动物存活情况作为指标，研究益母草针剂对犬缺血型ARF的治疗作用，治疗组犬于致肾哀后6小时及-1-5天，每天静脉注射药物1次20ml（相当于生药60g），两组动物都饲养至第7天处，病理检查结果表明，除Cr外，上述指标两组差异均十分明显，证明益母草针剂治疗犬缺血型初发型ARF具有显著效果。 8.其它作用： 益母草碱性皮射有中枢抑制作用，MLD为0.4-0.6g/kg。兔静脉注射益母草碱1mg/kg，可见尿量显著增加。益母草碱在较高浓度时能使兔血悬液发生溶血作用。益母草碱水浸液用试管稀释法1：13-1：10，对许兰氏毛菌，羊毛样小孢子菌、红色表皮癣菌、星状奴卡氏菌均有抑制作用。益母草煎剂用平板纸片法，对大肠杆菌、志贺氏痢疾杆菌有抑制作用。 毒理学 毒性： 益母草毒性很低。以益母草浸冒饲喂孕兔，虽引起流产，但对体温、呼吸、心率皆无影响，亦无其他中毒观象。益母草总碱给家兔每日皮射30mg/kg，连续2周，对进食、排便和体重均无影响；小鼠籍脉注射之半数致量为572.2土37.2mg/kg。由于其毒性低，而作用强度不及麦角制剂，故临床应用时可适当增加剂量。芜蔚子如1次服用在30克以上，可在4-6小时内发生中毒现象，如全身无力，下胶不能活动，周身酸痛，胸闷；重者有出汗，并呈虚脱状态。小鼠静脉注射益母草注射液的半数致量为30-60g/kg。小鼠静脉注射益母草总碱的半数致量为572.2±37.2mg/kg。 含量测定 对照品溶液的制备 精密称取经105℃ 干燥至恒重的盐酸水苏碱对照品25mg，置25ml量瓶中。加0.1mol/L盐酸溶液使溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml 中含盐酸水苏碱 1mg）。 供试品溶液的制备 取本品粉末（鲜品干燥后粉碎，过三号筛）约3g〔同时另取本品粉末测定水分（附录Ⅸ H第一法）〕，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙醇50ml，称定重量，超声处理（功率350W，频率35kHz ）30分钟，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，置蒸发皿中，于水浴上蒸干，精密加入0.1mol/L盐酸溶液10ml使溶解，加活性炭0.5g，置水浴中加热半分钟，搅拌，滤过，滤液置25ml量瓶中，用0.1mol/L盐酸溶液分次洗涤蒸发皿和滤器，洗液并入同一量瓶中，备用。 测定法 精密量取对照品溶液10ml，置25ml量瓶中，另取0.1mol/L盐酸溶液20ml，置25ml量瓶中。在对照品溶液、0.1mol/L盐酸溶液及上述备用供试品溶液的量瓶中，各精密加入新制的2％ 硫氰酸铬铵溶液 3ml，摇匀，加0.1mol/L盐酸溶液至刻度，摇匀，置冰浴中放置1 小时，用干燥滤纸滤过，取续滤液，以0.1mol/L盐酸溶液为空白，照分光光度法（附录Ⅴ B），在520nm 的波长处分别测定吸收度，用空白试剂的吸收度分别减去对照品与供试品的吸收度，计算，即得。 本品按干燥品计算，含生物碱以盐酸水苏碱（C7H13NO2·HCl）计，干品不得少于0.40％；鲜品不得少于1.0％。 性味归经苦、辛，微寒。归肝、心包经。 功能主治活血调经，利尿消肿。用于月经不调，痛经，经闭，恶露不尽，水肿尿少；急性肾炎水肿。 用法用量 9～30g；鲜品12～40g。 注意孕妇禁用。 贮藏干益母草置干燥处；鲜益母草置阴凉潮湿处。 制剂（1）益母草流浸膏（2）益母草膏 摘录《中国药典》 益母草含有多种微量元素。硒具有增强免疫细胞活力、缓和动脉粥样硬化之发生以及提高肌体防御疾病功能体系之作用；锰能抗氧化、防衰老、抗疲劳及抑制癌细胞的增生。所以，益母草能益颜美容，抗衰防老。 益母草的一些副作用: 益母草能加重痛经；致产后宫缩痛。以益母草浸膏饲喂孕兔会引起流产。 益母草具有肾毒性。动物实验表明，益母草可引起大鼠肾间质轻度炎症及少量纤维组织增生、肾小管轻度脂肪变 。临床上也有益母草致急性肾功能衰竭的报道。 日本研究人员用小鼠做益母草实验研究的抗癌作用，却意外地发现会刺激与怀孕有关的乳腺癌的增长[6]。 益母草能导致过敏反应，患者出现皮肤发红、胸闷心慌、呼吸加快。过量服用益母草膏后能出现腹泻腹痛[8]。也有服用益母草中毒致的报道。

国家药典委员会发布《关于<中国药典>2015年版一部拟质量标准修订品种的公示》，就《中国药典》2015年版一部收载品种拟质量标准修订的4个品种予以公示，标准公示日期3个月。

据了解，此次公示拟质量标准修订的4个品种为黄芩提取物、益母草膏、益母草颗粒、万氏牛黄清心丸。

1、黄芩提取物

Huangqin Tiquwu

SCUTELLARIA EXTRACT

制法取黄芩，加水煎煮，合并煎液，浓缩至适量，用盐酸调节pH值至1.0～2.0，80℃保温，静置，滤过，沉淀物加适量水搅匀，用40%氢氧化钠溶液调节pH值至7.0，加等量乙醇，搅拌使溶解，滤过，滤液用盐酸调节pH值至1.0～2.0，60℃保温，静置，滤过，沉淀依次用适量水及不同浓度的乙醇洗至中性，挥尽乙醇，减压干燥，即得。

2、益母草膏

Yimucao Gao

本品为益母草经加工制成的煎膏。

制法取益母草，切碎，加水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.21～1.25（80℃）的清膏。每100g清膏加红糖200g，加热溶化，混匀，浓缩至规定的相对密度，即得。

性状本品为棕黑色稠厚的半流体；气微，味苦、甜。

鉴别在[含量测定]项色谱图中，供试品色谱中应呈现与对照品色谱峰保留时间一致的色谱峰。

检查相对密度应不低于1.36（通则0183）。

其他应符合煎膏剂项下有关的各项规定（通则0183）。

含量测定照高效液相色谱法（通则0512）测定。

色谱条件与系统适用性试验以强阳离子交换键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-磷酸（15：85：0.15）为流动相；检测波长为192nm。理论板数按盐酸水苏碱峰计算应不低于2000。

对照品溶液制备取盐酸水苏碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，即得。

供试品溶液制备取本品，摇匀，取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入0.5%盐酸甲醇溶液25ml，称定重量，超声处理（功率250W，频率33kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用0.5%盐酸甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每1g含盐酸水苏碱（C7H13NO2·HCl）计，不得少于3.6mg。

功能与主治活血调经。用于血瘀所致的月经不调、产后恶露不绝，症见月经量少、淋漓不净、产后出血时间过长；产后子宫复旧不全见上述证候者。

用法与用量口服。一次10g，一日1～2次。

注意孕妇禁用。

规格（1）每瓶装120g（2）每瓶装125g（3）每瓶装250g

贮藏密封。

3、益母草颗粒

Yimucao Keli

处方益母草1350g

制法取益母草，切碎，加水煎煮3小时，煎液滤过，滤液浓缩至相对密度为1.04（90～95℃）的清膏，静置，取上清液，浓缩至相对密度为1.36～1.38（83℃）的稠膏；或浓缩至相对密度为1.15～1.18（50℃）的清膏，清膏经喷雾干燥成浸膏粉，加蔗糖600g和适量的糊精，混匀，制成颗粒，干燥，制成1000g[规格（1）]；或加糊精、甜菊糖适量；或加糊精、淀粉适量，分别制成颗粒，干燥，制成333g[规格（2）]；或加糊精及淀粉适量，制成颗粒，干燥，制成267g[规格（3）]。或取益母草，切碎，加水适量，于95?3℃动态浸提2小时，浸出液经固液分离，超速离心，澄清液减压浓缩至相对密度为1.10（50℃）的清膏，喷雾干燥成细粉，加糊精、麦芽糊精及甜菊素适量，混匀，制成颗粒，干燥，制成133g[规格（4）]，即得。

性状本品为棕**至棕褐色的颗粒；味甜、微苦或味苦、微甜或微苦（无甜菊糖或蔗糖）。

鉴别（1）取本品5g[规格（1）]、2g[规格（2）、（3）]或1g[规格（4）]，加沸水30ml使溶解，放冷，离心（3000转/分钟），取上清液，加于聚酰胺柱（80～100目，3g，湿法装柱）上，用水50ml洗脱，弃去水洗脱液，再用20%乙醇50ml洗脱，弃去20%乙醇洗脱液，最后用70%乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，离心，取上清液作为供试品溶液。另取益母草对照药材1g，加水50ml煮沸1小时，放冷，滤过，滤液浓缩至约30ml，加乙酸乙酯振摇提取2次，每次30ml，合并乙酸乙酯提取液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5：3：1：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铝乙醇溶液，在105℃烘约5分钟，在紫外光（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

（2）在〔含量测定〕项下的色谱图中，供试品色谱中应呈现与对照品色谱峰保留时间相对应的色谱峰。

检查应符合颗粒剂项下有关的各项规定（通则0104）

含量测定照高效液相色谱法（通则0512）测定。

色谱条件与系统适用性试验以强阳离子交换键合硅胶为填充剂（SCX-强阳离子交换树脂柱）；以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾-磷酸（15：85：0.15）为流动相；检测波长为192nm。理论板数按盐酸水苏碱峰计算，应不低于2000。

对照品溶液制备取盐酸水苏碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。

供试品溶液制备取装量差异项下的本品，混匀，取适量，研细，取约1g[规格（1）]、0.4g[规格（2）、（3）]或0.2g[规格（4）]，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入0.5%盐酸甲醇溶液25ml，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率33kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用0.5%盐酸甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每袋含益母草以盐酸水苏碱（C7H13NO2·HCl）计，不得少于27.0mg。

功能与主治活血调经。用于血瘀所致的月经不调、产后恶露不绝，症见

经水量少、淋漓不净、产后出血时间过长；产后子宫复旧不全见上述证候者。

用法与用量开水冲服。一次1袋，一日2次。

注意孕妇禁用。

规格每袋装（1）15g（2）5g（3）4g（4）2g（无蔗糖或甜菊糖）

贮藏密封

4、万氏牛黄清心丸

Wanshi Niuhuang Qingxin Wan

处方牛黄10g朱砂60g

黄连200g栀子120g

郁金80g黄芩120g

制法以上六味，除牛黄外，朱砂水飞成极细粉；其余黄连等四味粉碎成细粉；将牛黄研细，与上述粉末配研，过筛，混匀。每100g粉末加炼蜜100～120g制成大蜜丸，即得。

性状本品为红棕色至棕褐色的大蜜丸；气特异，味甜、微涩、苦。

鉴别（1）取本品，置显微镜下观察：糊化淀粉粒团块几乎无色（郁金）。种皮石细

胞**或淡棕色，多破碎，完整者长多角形、长方形或不规则形，壁厚，有大的圆形纹孔，胞腔棕红色（栀子）。韧皮纤维淡**，梭形，壁厚，孔沟细（黄芩）。纤维束鲜**，壁稍厚，纹孔明显（黄连）。不规则细小颗粒暗棕色，有光泽，边缘暗黑色（朱砂）。

（2）取本品3g，加水适量，研匀，反复洗去悬浮物，可得少量朱红色沉淀。取沉淀，加入盐酸1ml及少量铜片，加热煮沸，铜片由**变为银白色。

（3）取本品3g，剪碎，加硅藻土0.6g，研匀，加三氯甲烷10ml、冰醋酸0.5ml，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。另取胆酸对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-醋酸（6：32：1：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%磷钼酸乙醇溶液，在110℃加热约10分钟。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

（4）取本品3g，剪碎，加硅藻土0.5g，研匀，加甲醇20ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液作为供试品溶液。另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5：3：1：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

（5）取本品3g，加15ml，研磨，弃去液，药渣挥去，加乙酸乙酯30m1，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇3ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。另取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水（10；7：2：0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热约10分钟。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

（6）取[含量测定]黄连项下的供试品溶液作为供试品溶液。取黄连对照药材50mg，加甲醇10ml，加热回流15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。另取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-浓氨试液（12：6：3：3：1）为展开剂，在氨蒸汽饱和下展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同的**荧光斑点。

检查猪去氧胆酸取本品，剪碎，取0.6g，加入等量硅藻土，研细，加甲醇50ml，加热回流3小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇5ml超声使溶解，离心，取上清液作为供试品溶液。另取猪去氧胆酸对照品，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯-36%乙酸-甲醇（20：25：2：3）的上层溶液为展开剂，展开2次，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别在日光及紫外光（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点及荧光斑点。

游离胆红素照高效液相色谱法（通则0512）测定（避光操作）。

色谱条件与系统适用性试验同[含量测定]胆红素项下。

对照品溶液的制备取胆红素对照品适量，精密称定，加二氯甲烷制成每1ml含6.5μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取重量差异项下的本品，剪碎，取约2g，精密称定，精密加入无水碳酸钙适量（根据样品含水量加入1～2倍量），充分混匀后研细，取粉末适量（相当于取本品约413mg），精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入二氯甲烷20ml，密塞，称定重量，涡旋至充分混匀，冰浴超声处理（功率500W，频率53kHz）30分钟，再称定重量，用二氯甲烷补足减失的重量，摇匀，离心（转速为每分钟4000转），取二氯甲烷液，滤过，取续滤液，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

供试品色谱中，在与对照品色谱峰保留时间相对应的位置上，出现的色谱峰应小于对

照品色谱峰，或不出现色谱峰。

其他应符合丸剂项下有关的各项规定（通则0108）。

含量测定胆红素照高效液相色谱法（通则0512）测定（避光操作）。

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-1%冰醋酸（95：5）为流动相；检测波长为450nm。理论板数按胆红素峰计算应不低于3000。

对照品溶液的制备取胆红素对照品适量，精密称定，加二氯甲烷制成每1ml含10μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取重量差异项下本品，剪碎，取约0.5g，精密称定，精密加入硅藻土适量，充分混匀后研细，取粉末适量（相当于取本品约0.1g），精密称定，置具塞锥形瓶中，加入10%草酸溶液（含0.15%十六烷基三甲基氯化铵）4ml，密塞，涡旋至充分混匀，精密加入水饱和二氯甲烷20ml，密塞，称定重量，涡旋至充分混匀，超声处理（功率500W，频率53KHz）30分钟，放冷，再称定重量，用水饱和二氯甲烷补足减失的重量，摇匀，离心（转速为每分钟4000转），取二氯甲烷液，滤过，取续滤液，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每丸含牛黄或体外培育牛黄以胆红素（C33H36N4O6）计，[规格（1）]不得少于2.0mg、[规格（2）]不得少于4.0mg。

朱砂取重量差异项下的本品，剪碎，混匀，取约5g，精密称定，置250ml凯氏烧瓶中，加硫酸30ml与硝酸钾8g，加热俟溶液至近无色，放冷，转入250m1锥形瓶中，用水50ml分次洗涤烧瓶，洗液并入溶液中，加1%高锰酸钾溶液至显粉红色且两分钟内不消失，再滴加2%硫酸亚铁溶液至红色消失后，加硫酸铁铵指示液2ml，用硫氰酸铵滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml硫氰酸铵滴定液（0.1mol/L）相当于11.63mg的硫化汞（HgS）。

本品每丸含朱砂以硫化汞（HgS）计，（1）应为69～90mg；（2）应为138～180mg。

黄连照高效液相色谱法（通则0512）测定。

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（50：50）（每100ml中加十二烷基磺酸钠0.4g，再以磷酸调节pH值为4.0）为流动相；检测波长为345nm。理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于5000。

对照品溶液的制备取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含80μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取重量差异项下本品，剪碎，混匀，取约0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入盐酸-甲醇（1：100）混合溶液25ml，称定重量，85℃水浴中加热回流40分钟，放冷，再称定重量，用盐酸-甲醇（1：100）混合溶液补足减失的重量，摇匀，离心，上清液滤过，取续滤液，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每丸含黄连以盐酸小檗碱（C20H17NO4·HCl）计，小丸不得少于7.5mg；大丸不得少于15.0mg。

功能与主治清热解毒，镇惊安神。用于热入心包、热盛动风证，症见高热烦躁、神昏谵语及小儿高热惊厥。

用法与用量口服。一次2丸[规格（1）]或一次1丸[规格（2）]，一日2～3次。

注意孕妇慎用。

规格（1）每丸重1.5g（2）每丸重3g

贮藏密封。