吖啶盐和吖啶酯的区别-吖啶啥意思

酶促反应的发光底物

酶促反应的发光底物是指经酶的降解作用而发出光的一类发光底物，目前化学发光酶免疫技术中常用的酶有辣根过氧化物酶（HRP）和碱性磷酸酶（AP）。HRP的发光底物为鲁米诺或其衍生物和对-羟基苯乙酸。AP的发光底物为3-（2-螺旋金刚烷-4-甲氧基-4-甲基-4-（3-磷酸氧基）-苯基-1，2-二氧乙烷（AMPPD）和4-甲基伞形酮磷酸盐（4-MUP，荧光底物）。

（1）.鲁米诺或其衍生物。 鲁米诺的氧化反应在碱性缓冲液中进行，通常以0.1mol/L pH8.6Tris缓冲液作底物液。要注意是:首先,鲁米诺和H2O2在无HRP催化时也能缓慢自发发光，而在最后光强度测定中造成空白干扰，因而宜分别配制成2瓶试剂溶液，只在用前即刻混合;其次, HRP发光增强剂如某些酚试剂（如邻－碘酚）或萤火虫荧光素酶可增强HRP催化鲁米诺氧化的反应和延长发光时间，提高发光敏感度。

（2）.对-羟基苯乙酸（HPA)。 对-羟基苯乙酸（HPA）在H2O2存在下被HRP氧化或氧化二聚体（荧光物质），在350nm激发光作用下，发出450nm波长的荧光，可用荧光光度计测量。

（3）.AMPPD。 AMPPD在碱性条件下，被ALP酶解生成相当稳定的AMP-D阴离子，其有2-30min的分解半衰期，发出波长为470nm的持续性光，在15min时其强度达到高峰，15-60min内光强度保持相对稳定。

（4）4-MUP。 4-MUP被ALP催化生成4-甲基伞形酮，在360nm的激发光的作用下，发出448nm的荧光，用荧光光度计进行测量。

直接化学发光剂

直接化学发光剂不需酶的催化作用，只需改变溶液的pH等条件就能发光的物质，如吖啶酯（acridinium, AE）在有过氧化氢的稀碱溶液中即能发光。

电化学发光剂

电化学发光剂是指通过在电极表面进行电化学反应而发出光的物质。化学发光剂三联吡啶钌[Ru(bpy)3]2+（图16-7）和电子供体三丙胺（TPA）在阳性电极表面可同时失去一个电子而发生氧化反应。二价的[Ru(bpy)3]2+被氧化成三价，成为强氧化剂，TPA失去电子后被氧化成阳离子自由基TPA+，它很不稳定，可自发地失去一个质子（H+），形成自由基TPA.，成为一种很强的还原剂，可将一个高能量的电子递给三价的[Ru(bpy)3]3+使其形成激发态的[Ru(bpy)3]2+.。激发态的三联吡啶钌不稳定，很快发射出一个波长为620nm的光子，回复到基态的三联吡啶钌。这一过程可在电极表面周而复始地进行，产生许多光子，使光信号增强。

使用吖啶酯标记抗原或抗体的自动化免疫分析仪器设计原理是

你好 吖啶酯化学发光法检测艾滋病属于第四代检测方法，发光法和酶联一样准确的

从理论上来讲四代试剂的窗口期会比三代缩短7-12天左右。一般发生高危险后3个月复查 如果仍是阴性的话 基本可以排除感染了

发光底物吖啶酯和鲁米诺哪个更好？

正确答案是：C.化学发光免疫测定原理。

吖啶酯化学发光法属于化学发光免疫分析，其原理是利用抗原-抗体反应，将吖啶酯直接标记在抗原或抗体上，与待测样本中的相应抗体或抗原结合后，在H2O2和NaOH存在下，可发生化学发光反应，通过光电倍增管将化学发光转化为光子，由光子计数器进行光电转换并进行测定（C对）。

化学发光免疫分析仪的发光试剂

吖啶酯类的直接化学发光剂不需酶的催化作用，只需改变溶液的pH等条件就能发光。

吖啶酯的化学发光量子产率比鲁米诺高，而且吖啶酯标记条件温和，标记率高，标记后不影响分离。

吖啶酯和鲁米诺两者价格也相差很大。武汉德晟生化建议您根据不同实验需要选购不同发光剂

吖啶酯标记大分子困难还是小分子困难

HRP 标记的CLEIA常用的底物为鲁米诺(32氨基邻苯二甲酰肼,lum ino l) ,或其衍生物如异鲁米诺(42氨基邻苯二甲酰肼) , 是一类重要的发光试剂。其结构如图4 所示。鲁米诺的氧化反应在碱性缓冲液中进行,在过氧化物酶及活性氧[ 过氧化阴离子(O 2- ) , 单线态氧(1O 2 ) , 羟自由基(OH·) , 过氧化氢(H2O 2)]存在下,生成激发态中间体, 当其回到基态时发光, 其波长为425nm。

早期用鲁米诺直接标记抗原(或抗体) ,但标记后发光强度降低而使灵敏度受到影响。近来用过氧化物酶标记抗体, 进行免疫反应后利用鲁米诺作为发光底物, 在过氧化物酶和起动发光试剂(NaOH2H2O 2) 作用下, 鲁米诺发光, 发光强度依赖于酶免疫反应物中酶的浓度。Kodak Am erliteTM半自动分析系统就是利用这一体系专门设计的。

吖啶酯是一种光敏染料，可以与大分子如蛋白质等进行共价结合形成标记物，用于生物化学和细胞生物学研究中。然而，吖啶酯标记大分子和小分子都可能面临一些困难。

对于大分子，如蛋白质等，吖啶酯可能难以与其进行有效的共价结合，因为大分子的复杂性、多样性和大小形状等方面的限制。对于小分子，吖啶酯可能难以在复杂生物化学环境中对其进行准确的标记，因为小分子的反应活性较高，且其分子结构可能影响吖啶酯的结合。

另外，建议用G25脱盐柱分离吖啶酯标记的大分子化合物，而吖啶酯标记的小分子化合物则建议用柱层析分离。

因此，可以说，吖啶酯标记大分子和小分子都可能存在困难，具体困难程度取决于具体的实验条件和目标。在进行实验时，需要综合考虑各种因素，选择最合适的方法进行标记。