原料药的含量测定首选什么方法, 为什么?-原料药的含量测定首选

2024-11-11 05:33:11

第十四章磺胺类药物的分析

　第一节结构、性质和鉴别试验

　一、结构与性质：都是对氨基苯磺酰胺的衍生物

　磺胺嘧啶（SD）磺胺甲唑（SMZ）

　2、鉴别试验：

　1、芳伯氨基的反应：（1）重氮化偶合反应（2）与芳醛的缩合反应：酸液中成有色希夫氏碱

　2、与硫酸铜成盐：磺酰胺上的氢原子有酸性，和金属离子成难溶性沉淀。呈色不同鉴别

　3、N 取代基的反应：含氮杂环与有机碱沉淀剂沉淀。

　7、红外分光光度法

　第二节含量测定

　一、原料药和普通制剂的含量测定：亚硝酸钠滴定法

　二、溶出度的测定：以盐酸溶液为释放介质，紫外分光光度法测吸收系数。

　3、复4、方磺胺制剂的含量测定：

　1、双波长分光光度法：90版测定复方磺胺制剂的含量

　2、高效液相色谱法：美国药典用此法测定含量

　第十五章杂环类药物的分析

　第一节吡啶类药物的分析

　一、结构和性质：异烟肼尼可刹米

　二、鉴别试验：

　1、异烟肼的鉴别试验：2000版规定：加氨制硝酸银，产生气泡与黑色混浊，管壁生成银镜。

　（1）还原反应：酰肼基具有还原性，还原硝酸银中的Ag 成单质银，肼基氧化成氮气。

　（2）缩合反应：酰肼基和含羰基的试剂（芳醛）发生缩合反应。与香草醛缩合、测熔点用于鉴别。

　（3）沉淀反应：分子中吡啶环有碱性，可以和重金属盐类（氯化汞、硫酸铜、碘化铋钾）以及苦味酸形成沉淀。

　2、尼可刹米鉴别试验：

　（1）戊烯二醛反应：属吡啶环的开环反应。与溴化氰开环成戊烯二醛衍生物，（2）再与苯胺缩合，（3）

　成**希夫氏碱。异烟肼氧化为异烟酸后亦可发生类似反应。

　（4）水解反应：与硫酸铜或硫氰酸铵

　三、异烟肼中游离肼检查：薄层色谱法检查原料药和注射剂中的游离肼。

　5、含量测定：

　1、异烟肼的含量测定：氧化还原滴定法，2000采用溴酸钾法。除原料药外，片剂、注射剂均用。

　2、尼可刹米含量测定：

　（1）非水溶液滴定法（吡啶环具碱性）：原料药测定（2）紫外分光光度法：注射剂测定

　第二节吩噻嗪类药物的分析

　一、典型药物的结构和化学性质：硫原子有还原性，遇氧化剂氧化。

　盐酸异丙嗪盐酸氯丙嗪

　二、鉴别试验：

　1、紫外分光光度法：紫外吸收的特征吸收较强。

　2、氧化反应：本类药物可被硫酸、硝酸等氧化剂氧化呈色。

　3、Cl 的反应：因为盐酸盐。

　三、含量测定：

　1、非水溶液滴定法：原料药含量测定，氮原子碱性极弱

　2、紫外分光光度法：注射剂均加有维生素C作抗氧剂，避开VC吸收峰。

　第三节苯骈二氮杂类药物的分析

　一、典型药物的结构和化学性质：氯氮、地西泮

　环上氮原子具有碱性，和有机碱沉淀剂沉淀，非水溶液滴定法测含量，有氯原子取代，紫外吸收。

　二、鉴别试验：

　（1）沉淀反应：两者氮原子具有碱性，酸性液中与碘化铋钾沉淀。

　（2）水解后重氮化偶合反应：氯氮有此反应；地西泮无此反应

　（3）硫酸——荧光反应：（4）紫外分光光度法（5）氯元素的鉴别：燃烧破坏后测定

　三、特殊杂质检查：地西泮检查去甲基安定，注射剂采用高效液相色谱法测定含量。

　四、含量测定：

　1、非水溶液滴定法：

　2、紫外分光光度法：片剂含量测定两者均用该法，均检查溶出度。

　3、高效液相色谱法：中国药典用本法

　第十六章生物碱类药物的分析

　第一节典型药物的结构与化学性质

　一、苯烃胺类：盐酸麻黄碱（左旋体）、盐酸伪麻黄碱（右旋体）

　二、托烷类：硫酸阿托品（消旋体）、氢溴酸山莨菪碱（左旋体）

　三、喹啉类：硫酸奎宁（左旋体）、硫酸奎尼丁（右旋体）

　四、异喹啉类：盐酸吗啡（有酚羟基）、磷酸可待因（无酚羟基）

　6、吲哚类：硝酸士的宁、利血平

　7、黄嘌8、呤类：咖啡因、茶碱

　第二节鉴别试验

　一、特征鉴别反应：

　1、双缩脲反应：芳环侧链具有氨基醇结构的特征反应。盐酸麻黄碱和伪麻黄碱碱液中与硫酸铜

　2、Vitali反应：托烷生物碱的特征反应。硫酸阿托品和氢溴酸山莨菪碱均有此反应。

　3、绿奎宁（Thalleiaqllin）反应：含氧喹啉衍生物的特征反应。硫酸奎宁、硫酸奎尼丁均显。

　5、 Marquis反应：吗啡生物碱的特征反应。

　6、 Frohde反应：吗啡生物碱的特征反应

　7、官能团的反应：吲哚生物碱的特征反应。利血平与芳醛缩合

　8、紫脲酸铵反应：黄嘌9、呤类生物碱的特征反应

　10、还原反应：盐酸吗啡（弱还原性，11、还原铁氰化钾）和磷酸可待因（无还原性无此反应）区分反应

　二、一般鉴别试验：

　1、熔点测定法：氨茶碱、磷酸可待因用此法

　2、显色反应：大多生物碱与显色剂显色，有浓硫酸、浓硝酸、钼硫酸、钒硫酸、甲醛硫酸等。

　3、沉淀反应：生物碱在酸性液中与重金属盐类（碘化铋钾、碘化汞钾、碘-碘化钾、二氯化汞）和大分子酸（磷钼酸、硅钨酸）生成难溶性沉淀。

　4、紫外光谱法：

　8、红外吸收光谱法：

　9、薄层色谱法：中国药典用薄层色谱法对阿片进行鉴别。

　第三节特殊杂质检查

　第四节含量测定

　1、非水溶液滴定法：

　1、氢卤酸盐测定：滴定生物碱的氢卤酸盐时，加入醋酸汞的冰醋酸溶液，使氢卤酸生成在冰醋酸中难解离的卤化汞，消除滴定影响。理论量的2.4倍。

　2、硫酸盐的测定：在冰醋酸介质中只能被滴定至硫酸氢盐。

　3、硝酸盐的测定：在冰醋酸中为弱酸，但具有氧化性，使指示剂变色，故用电位法。

　9、磷酸盐的测定：酸性极弱，10、可按常法测定。

　2、提取中和法：原理：利用生物碱盐类溶于水，而3、生物碱不4、溶于水。

　1、碱化：氨水为常用的碱化试剂。

　2、提取溶剂：氯仿是最常用的提取试剂。提取4次。提取终点（加生物碱沉淀剂无沉淀产生）

　3、滴定

　5、酸性染料比色法：酸性染料有甲基橙、溴麝香草酚蓝、溴甲酚绿等。

　影响定量分析的因素：水相的最适PH值和有机溶剂对的提取完全是酸性染料比色法的实验关键

　1、水相的最适PH值 2、酸性染料的影响

　3、有机溶剂的影响：氯仿和二氯甲烷常用 4、水分的影响：严防水分混入

　5、共存物的影响：强酸有干扰

　6、紫外分光光度法：利血平

　第十七章糖类和苷类药物的分析

　第一节糖类药物的分析

　一、基本性质：葡萄糖属单糖

　二、鉴别试验：

　1、灼烧试验：蔗糖鉴别

　2、Fehling反应：醛基或酮基有还原性，在碱性酒石酸铜（Fehling试液）中还原铜成氧化亚铜。

　无水葡萄糖、葡萄糖注射液、葡萄糖氯化钠注射液均用此法鉴别。蔗糖

　三、葡萄糖与乳糖的杂质检查：

　1、葡萄糖一般检查项目：

　（1）酸度、氯化物和硫酸盐（2）溶液的澄清度与颜色：检查水中不溶性物质或有色杂质。

　（3）乙醇溶液的澄清度：淀粉和糊精（4）亚硫酸盐和可溶性淀粉

　2、葡萄糖注射液中5-羟甲基糖醛的测定：

　3、乳糖的杂质检查：“蛋白质”的检查，加硝酸汞

　四、含量测定：

　（1）原料药的含量测定：规定比旋度

　（2）制剂的含量测定：

　1、葡萄糖注射液含量测定：2000版用旋光法测定注射液、G氯化钠注射液复方制剂中G含量。

　2、葡萄糖氯化钠注射液含量测定：加糊精以形成保护胶体，加3.5%硼砂使PH=7.

　第二节苷类药物分析

　一、基本结构与性质：

　二、鉴别试验：

　（一）Keller-Kiliani反应：溶于微量FeCl 的冰醋酸液中，加浓硫酸成两层，交界处显色。全部

　（二）Kedde反应：用于去乙酰毛花苷的鉴别。

　（三）色谱法：1、纸色谱法：地高辛的鉴别

　2、薄层色谱法：去乙酰毛花苷及其注射液的鉴别

　3、高效液相色谱法：甲地高辛及其片剂的鉴别

　三、含量测定：比色法、荧光法、色谱法

在测定条件的选择中hplc法中应考虑的是

药品检验工作的基本程序：

　一般为取样、鉴别、检查、含量测定、写出报告。

　取样：

　鉴别：判断真伪。检查：称纯度检查，判定药物优劣。含量测定：测定药物中有效成分的含量。检验报告必须明确、肯定、有依据。计量仪器认证要求：县级以上人民政府计量行政部门负责进行监督检查。符合经济合理、就地就近。

　药品质量标准分析方法验证：

　目的是证明采用的方法适合于相应的检测要求。验证内容：准确度、精密度（包括重复性、中间精密度和重现性）、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性。

　一、准确度：是指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般以百分回收率表示。至少用9次测定结果进行评价。［医学教育网搜集整理］

　二、精密度：是指在规定的条件下，同一个均匀样品，经过多次取样测定所得结果之间的接近程度。用偏差、标准偏差或相对标准偏差表示。

　1、重复

　2、性：相同

　3、条件下，

　4、一个分析人员测定所得结果的精密度称为重复

　5、性。至少9次。

　6、中间精密度：

　7、一个实验室，

　8、不同

　9、时间不同

　10、分析人员用不同

　11、设备

　12、测定结果的精密度。

　3、重现性：不同实验室，不同分析人员测定结果的精密度。分析方法被法定标准采用应进行重现性试验。

　三、专属性：指在其他成分可能存在的情况下，采用的方法能准确测定出被测物的特性，用于复杂样品分析时相互干扰的程度。鉴别反应、杂质检查、含量测定方法，圴应考察专属性。

　四、检测限：指试样中被测物能被检测出的最低量，无须定量。用百分数、ppm或ppb表示。

　五、定量限：指样品中被测物能被定量测定的最低量，测定结果应具一定的精密度和准确度。

　六、线性：系指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。

　七、范围：能达到一定的精密度、准确度和线性的条件下，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。八、耐用性：指在一定的测定条件稍有变动时，测定结果不受影响的承受程度。

　药物分析的统计学知识

　测量误差：测量值和真实值之差。绝对误差和相对误差。真实值：是有经验的人用最可靠的方法对试样进行多次测定所得的平均值。

　系统误差：（1）方法误差（2）试剂误差（3）仪器误差（4）操作误差偶然误差：不可定误差或随机误差，由偶然原因引起。可增加平得测定次数。测量值的准确度表示测量的正确性，测量值的精密度表示测量的重现性。精密度是表示准确度的先决条件，只有在消除了系统误差后，才可用精密度同时表达准确度。

　提高分析准确度方法：

　1、选择合适的分析方法

　2、减少测量误差

　3、增加平行测定次数

　4、消除测量过程中的系统误差（校准仪器、做对照试验、做回收试验、做空白试验）有效数字的处理：0.05060g是四位有效数字。首位是8或9，有效数字可多记一位。ph=8.02是两位有效数字。四舍六入五成双原则。修约标准偏差或其他表示不确定度时，修约结果可使准确度估计值变得差一点。s= 2.13——2.2 g检验法、4d法，>舍去。

　药品质量标准制定的原则和基本内容

　原则：安全有效，技术先进，经济合理。检验方法：准确、灵敏、简便、快速。

　（一）、名称：

　（二）、性状：

　1、外观、臭、味和稳定性

　2、溶解度：一定程度上反映药品的纯度。

　3、物理常数

　（1）馏程：2000规定：在标准压力（101.3kpa）下，按药典装置，自开始馏出的第五滴算起，至供试品仅剩3-4ml或一定比例的容积馏出时的温度范围。

　（2）熔点：系指一种物质固体熔化成液体的温度，熔融同时分解的温度，或在熔化时自初熔至全熔的一段温度。

　（3）凝点：系指一种物质由液体凝结为固体时，在短时间内停留不变的温度。

　（4）比旋度：具光学异构体分子的药物，旋光性能不同。按干燥品或无水物计算。准确至0.01 .

　（5）折光率：光线自一种透明介质进入另一种透明介质时，两种介质密度不同，光的进行速度发生变化，即发生折射现象，遵从折射定律。对于液体药品，尤其是植物油，检查药品的纯杂程度，测定溶液的浓度。

　（6）粘度：流体对流动的阻抗能力。共三法，毛细管内径。

　（7）吸收系数：物质对光的选择性吸收波长。［医学教育网搜集整理］

　（三）鉴别：用理化方法或生物学方法来证明药品真实性的方法。对已知物。

　（四）杂质检查：有效性，纯度要求和安全性。

　1、有效性试验

　2、酸碱度

　3、溶液的澄清度与颜色

　4、无机阴离子：氯化物和硫酸盐。

　5、有机杂质

　6、干燥失重和水分

　7、炽灼残渣：指硫酸化灰分，用于考察有机药物中混入的无机杂质。一般限度为0.1% .

　8、金属离子和重金属检查每日剂量0.5g以上且长期服用的品种。

　9、硒和砷：硒检查有：醋酸地塞米松、醋酸曲安奈德及醋酸氟轻松。第一法：古蔡氏法 10、安全性检查

　（五）含量测定或效价测定：理化方法称含量测定生物学方法或生化方法测定称效价测定。

　1、容量分析法：化学原料药含量测定的首选法。中和法、非水滴定法、银量法、络合法、碘量法、重氮化法。

　2、重量法：精密度好准确度高，

　3、繁琐，

　4、不

　5、能应用容量法时用。挥发法、萃取法、沉淀法

　6、紫外分光光度法：简便、快速。原料药避免。

　7、气相色谱法：分离效果优越，

　8、对含杂质和挥发性的原料药效好。维生素e

　9、高效液相色谱法：用于多组分抗生素，

　10、生化药品或因杂质干扰测定。常规方法又难分离药品。

硫酸阿托品原料药的含量测定的方法

滴定法的优势在于精密度和分析速度/成本，HPLC法的优势在于专属性。我认为当API总杂质小于0.5%时，由于HPLC法本身的误差就有1%左右，选择滴定法更好;杂质大于1%时，选择HPLC法更好。所以开发原料药含量测定方法时，我会把滴定法和HPLC法都做一遍，在合适的时间节点选择合适的方法。

滴定分析法，通常适于组分含量在1%以上的常量组分的分析，有时也可以用于测定微量组分。该法快速、准确、仪器设备简单、操作简便，可适用于各种化学反应类型的测定。分析结果的准确度较高，一般情况下，测定的相对误差可达0.1%左右。

但是对滴定的要求比较高需满足四个条件：(1)反应必须能定量地完成。即所测物质与标准溶液之间的反应要严格按一定的化学方程式进行，无副反应发生。反应的完全程度通常要求达到99.9%以上，这是定量计算的基础。(2)反应要迅速。(3)共存物不干扰主药反应或用适当的方法消除其干扰。(4)有比较简便的方法确定化学计量点。如指示剂法或其他方法。