吖啶酯标记抗体-吖啶酯标记抗体不稳定

2024-10-13 19:49:36

吖啶酯标记抗体-吖啶酯标记抗体不稳定

吖啶酯：ā dìng。

如果吖啶环上的取代基能与吖啶环上的C-9 和H2O2形成不稳定的二氧乙烷（此二氧乙烷可迅速分解为CO2 和电子激发态的N - 甲基吖啶酮，当回到基态时发出光子），则这类取代吖啶化合物可做为化学发光标记物。

根据取代基的不同，常用作化学发光标记物的吖啶取代物分为两类：吖啶酯和吖啶磺酰胺。它们的结构中都有共同的吖啶环。

它们的发光机理相同：在碱性H2O2 溶液中，分子受到过氧化氢离子进攻时，生成不稳定的二氧乙烷，此二氧乙烷分解为CO2 和电子激发态的N - 甲基吖啶酮，当其回到基态时发出最大发射波长为430nm 的光子。

吖啶酯或吖啶磺酰胺类化合物应用于化学发光免疫分析，通常采用的体系是Acridinium ester/ H2O2 系统。

即用吖啶酯或吖啶磺酰胺标记抗体或抗原，用HNO3+ H2O2 和NaOH 作发光启动试剂。有些在发光启动试剂中加入Triton X - 100 , CTAC , Tween - 20 等表面活性剂以增强发光。

化学发光免疫分析技术的类型

答案：B

免疫比浊分析法主要用于检测血浆、体液中的特定蛋白系列，如免疫球蛋白、补体、尿微量蛋白系列等；吖啶酯标记的化学发光免疫分析仪是一种用发光剂直接标记抗体或抗原的免疫分析法；全自动微孔板式ELISA分析仪是用参与催化某一反应的酶来标记抗原或抗体，常用标记酶有辣根过氧化物酶( HRP)和碱性磷酸酶(ALP)；电化学发光免疫分析仪是采用电化学发光技术、生物素放大技术，以顺磁性微粒为固相载体，用三联吡啶钌标记抗原或抗体，三丙胺( TPA)为电子供体，而设计的一种自动化分析仪器；异硫氰酸荧光素( FITC)是免疫荧光标记最常用的荧光探针。

化学发光免疫分析原理是什么

化学发光免疫分析法以标记方法的不同而分为两种:

(1)化学发光标记免疫分析法;

(2)酶标记、以化学发光底物作信号试剂的化学发光酶免疫分析法从标记免疫分析角度, 化学发光酶免疫分析( chem ilum inescen t enzym e imm unoassay,

CL E IA ) , 应属酶免疫分析, 只是酶反应的底物是发光剂, 操作步骤与酶免分析完全相同[ 5 ]: 以酶标记生物活性物质(如酶标记的抗原或抗体) 进行免疫反应, 免疫反应复合物上的酶再作用于发光底物, 在信号试剂作用下发光, 用发光信号测定仪进行发光测定。目前常用的标记酶为辣根过氧化物酶(HRP) 和碱性磷酸酶(AL P) , 它们有各自的发光底物。常用的底物为鲁米诺(32氨基邻苯二甲酰肼,lum ino l) , 或其衍生物如异鲁米诺(42氨基邻苯二甲酰肼) , 是一类重要的发光试剂。鲁米诺的氧化反应在碱性缓冲液中进行, 在过氧化物酶及活性氧[ 过氧化阴离子(O 2- ) , 单线态氧(1O 2 ) , 羟自由基(OH·) , 过氧化氢(H2O 2) ]存在下,生成激发态中间体, 当其回到基态时发光, 其波长为425nm。

早期用鲁米诺直接标记抗原(或抗体) , 但标记后发光强度降低而使灵敏度受到影响。近来用过氧化物酶标记抗体, 进行免疫反应后利用鲁米诺作为发光底物, 在过氧化物酶和起动发光试剂(N aOH2H2O 2) 作用下, 鲁米诺发光, 发光强度依赖于酶免疫反应物中酶的浓度。Kodak Am erliteTM 半自动分析系统就是利用这一体系专门设计的。 (enhanced lum ines2cence enzym e imm unoassay, ELEIA )

在发光系统中加入增强发光剂, 如对2碘苯酚等, 以增强发光信号, 并在较长时间内保持稳定, 便于重复测量, 从而提高分析灵敏度和准确性。在全自动分析仪上, 还可通过计算机严密控制, 进行自动操作, 如加试剂, 混合, 温育, 洗涤, 加发光试剂, 发光计数, 数据处理, 绘制标准曲线, 直至完成病人血清样品的分析并打印出结果。Am erliteTM 发光增强酶免分析系统用荧光素、噻唑等增强剂, 其发光时间可持续长达20m in, 试剂盒有甲状腺功能检测的

促甲状腺素、三碘甲腺原氨酸、甲状腺素、甲状腺素结合球蛋白、游离甲状腺素, 与性激素有关的有促黄体激素、促卵泡激素、人绒毛膜促性腺激素、甲胎蛋白、雌二醇、睾酮, 以及其他方面的如癌胚抗原、铁蛋白、地高辛等。所用底物为环1, 22二氧乙烷衍生物, 这是一类很有前途的发光底物 , 用于化学发光酶免分析底物而设计的分子结构中包含起稳定作用的基团——金刚烷基, 其分子中发光基团为芳香基团和酶作用的基团, 在酶及起动发光试剂作用下引起化学发光。最常使用的底物是AM PPD [ 32(2’2 sp iroadam an2tane ) 42m ethoxy242( 3’2 pho spho ryloxy) 2phenyl21,22dioxetane ], 中文名为: 32(2’2 螺金刚烷) 242甲氧基242(3’2 磷酰氧基) 2苯基21, 22环二氧乙烷)。在碱性磷酸酶(AL P) 作用下, 磷酸酯基发生水解而脱去一个磷酸基, 得到一个中等稳定的中间体AM PD (半寿期为2～ 30m in) , 此中间体经分子内电子转移裂解为一分子的金刚烷酮和一分子处于激发态的间氧苯甲酸甲酯阴离子, 当其回到基态时产生470nm 的光, 可持续几十分钟(如图5)。AM PPD 为磷酸酯酶的直接化学发光底物, 可用来检测碱性磷酸酯酶或酶和抗体、核酸探针及其它配基的结合物。可检测到碱性磷酸酯酶的浓度为10- 15mo l?L 。

美国DPC 公司的Imm u lite 全自动酶放大发光免疫分析仪, 以碱性磷酸酶为标记物, 以金刚烷作发光底物, 测定灵敏度相当于10- 21mo l?mL 的酶, 采用聚苯乙烯珠作载体, 其检测水平已能达到10- 12g?mL。

化学发光剂的常用发光剂

化学发光免疫分析原理是什么

化学发光免疫分析包含两个部分，即免疫反应系统和化学发光分析系统。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化，形成一个激发态的中间体，当这种激发态中间体回到稳定的基态时，同时发射出光子(hM)，利用发光讯号测量仪器测量光量子产额。免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体)直接标记在抗原(化学发光免疫分析)或抗体(免疫化学发光分析)上，或酶作用于发光底物。

化学发光免疫分析根据其所采用的标记物的不同可分为发光物标记、酶标记和元素标记化学发光免疫分析三大类。发光物标记的CLIA是以发光物质代替放射性核素或酶作为标记物(如吖啶酯)，在反应体系中发光物质在碱性介质中氧化时释放大量自由能，产生激发态的中问体，该激发态的中间体由最低振动能级回到稳定的基态，各个振动能级产生辐射时，同时产生能量，多余的能量即为发射光子，从而产生发光现象。利用发光讯号的测量仪器，分析接收的光量子产额，通过计算机系统转换成被测物质的浓度单位。在此系统中包含两个部分，化学发光反应系统和免疫反应系统，即在抗原一抗体特异性反应过程中，伴随有化学反应过程而产生光的发射现象。化学反应系统中以化学反应为基础，化学发光的首要条件是吸收了化学能而处于激发态的分子或原子必须能释放出光子或者能将能量转移到另一个物质的分子上并使这种分子激发，当这种分子回到基态时释放出光子。

化学发光与荧光的根本区别是形成激发态分子的激发能原理不同。荧光是发光物质吸收了激发光后使分子产生发射光；化学发光是化学反应过程中所产生的化学能使分子激发产生的发射光。因此，化学发光反应过程必须产生足够的激发能是产生发光效应的重要条件。化学发光反应可在气相、液相或固相反应体系中发生，以液相发光在免疫学检测中最常应用。摘自 :sd1861./xianghealth399.htm引自 :sd1861./

化学发光免疫分析法的原理

化学发光免疫分析原理

:yhyg./articleview/2008-1-25/article_view_4863.htm

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化学发光免疫分析报告

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化学发光免疫分析单怎样看

ck mb是什么意思

酶促反应的发光底物

酶促反应的发光底物是指经酶的降解作用而发出光的一类发光底物，目前化学发光酶免疫技术中常用的酶有辣根过氧化物酶（HRP）和碱性磷酸酶（AP）。HRP的发光底物为鲁米诺或其衍生物和对-羟基苯乙酸。AP的发光底物为3-（2-螺旋金刚烷-4-甲氧基-4-甲基-4-（3-磷酸氧基）-苯基-1，2-二氧乙烷（AMPPD）和4-甲基伞形酮磷酸盐（4-MUP，荧光底物）。

（1）.鲁米诺或其衍生物。鲁米诺的氧化反应在碱性缓冲液中进行，通常以0.1mol/L pH8.6Tris缓冲液作底物液。要注意是:首先,鲁米诺和H2O2在无HRP催化时也能缓慢自发发光，而在最后光强度测定中造成空白干扰，因而宜分别配制成2瓶试剂溶液，只在用前即刻混合;其次, HRP发光增强剂如某些酚试剂（如邻－碘酚）或萤火虫荧光素酶可增强HRP催化鲁米诺氧化的反应和延长发光时间，提高发光敏感度。

（2）.对-羟基苯乙酸（HPA)。对-羟基苯乙酸（HPA）在H2O2存在下被HRP氧化或氧化二聚体（荧光物质），在350nm激发光作用下，发出450nm波长的荧光，可用荧光光度计测量。

（3）.AMPPD。 AMPPD在碱性条件下，被ALP酶解生成相当稳定的AMP-D阴离子，其有2-30min的分解半衰期，发出波长为470nm的持续性光，在15min时其强度达到高峰，15-60min内光强度保持相对稳定。

（4）4-MUP。 4-MUP被ALP催化生成4-甲基伞形酮，在360nm的激发光的作用下，发出448nm的荧光，用荧光光度计进行测量。

直接化学发光剂

直接化学发光剂不需酶的催化作用，只需改变溶液的pH等条件就能发光的物质，如吖啶酯（acridinium, AE）在有过氧化氢的稀碱溶液中即能发光。

电化学发光剂

电化学发光剂是指通过在电极表面进行电化学反应而发出光的物质。化学发光剂三联吡啶钌[Ru(bpy)3]2+（图16-7）和电子供体三丙胺（TPA）在阳性电极表面可同时失去一个电子而发生氧化反应。二价的[Ru(bpy)3]2+被氧化成三价，成为强氧化剂，TPA失去电子后被氧化成阳离子自由基TPA+，它很不稳定，可自发地失去一个质子（H+），形成自由基TPA.，成为一种很强的还原剂，可将一个高能量的电子递给三价的[Ru(bpy)3]3+使其形成激发态的[Ru(bpy)3]2+.。激发态的三联吡啶钌不稳定，很快发射出一个波长为620nm的光子，回复到基态的三联吡啶钌。这一过程可在电极表面周而复始地进行，产生许多光子，使光信号增强。

体外诊断试剂性能指标——灵敏度

　creatine kinase-MB，即是ck mb，那它的意思是?下面是我给大家整理的ck mb是什么意思，供大家参阅!

ck mb是什么意思

　肌酸激酶同工酶

　例句：

　1. In the past we relied on creatine kinase or the MB fragment of creatine kinase.

　过去我们依靠肌酸激酶或肌酸激酶MB(CKMB) 片段进行诊断.

　2. Objective To investigate the clinical significance of serum creatine kinase ( CK ) and its isoenyme ( CK - MM ) through observing their dynamic change.

　目的观察创伤患者血清肌酸激酶 ( CK ) 及其同功酶 ( CK-MM ) 的动态变化,探讨其临床意义.

　3. There may be features of autonomic instability, and serum creatine kinase ( CK ) may be elevated.

　可能有自主神经症状, 血清肌酸激酶可能升高.

ck mb英文注解

　中文名称：肌酸磷化脢-同功脢MB

　临床用途：CK-MB 是 CK 的同功脢之一，大部份都来自於心肌，是非常重要的心肌指标。临床将它当作急性心肌梗塞 (AMI) 的辅助诊断工具，也用在心肌梗塞发作後血栓溶解治疗的监控指标。

　CK (Creatine kinase) 可分成三种同功脢，CK-BB、CK-MB、CK-MM。CK-BB 大多存在於脑中，CK-MB 则以心肌含量最多，CK-MM 在骨骼肌中占 90%。因此 CK-MB 对心肌有较高的特异性，特别在急性心肌梗塞 (AMI) 发作时会大量分泌到血液当中。CK-MB 会在心肌梗塞发生後 4 ~ 6 小时上升，24 小时达到最高点，3 天内恢复正常。严重 AMI 发生时，CK 及 CK-MB 都会上升;若只有轻度梗塞，CK 的数值就不一定会上升，但 CK-MB 通常还是会出现异常。虽然如此，也不能只凭 CK-MB 一个项目上升，就断言 AMI 的发生，有时严重的骨骼肌伤害也会引起 CK-MB 明显上升，应参考其他的项目或理学检查才下诊断。

　临床上使用 CK-MB 来诊断 AMI 已行之多年，也建立了良好的使用判读模式。虽然新的心肌梗塞指标不断被研发出来，至少到目前为止它还是重要的诊断参考依据。

　健保代码：09071C

　正常参考值：< 5.0 ng/mL

　检体处理：血清或 heparin 血浆 0.5 mL。采血後尽速与血球分离，避免溶血。室温下仅安定 3 小时;冷藏可保存 1 天;冷冻可保存 2 天，冷冻-解冻以一次为限。

CK-MB综述

　一，CK-MB介绍

　肌酸激酶(CK)主要存在于脊椎动物中，通常存在于动物的心脏，骨骼肌以及脑等组织的细胞质和线粒体中。CK催化肌酸和ATP或磷酸肌酸和ADP之间磷酸转移的可逆反应。CK活性在人体中存在较广泛，在血中半衰期约为6-8小时。CK与ATP的再生有关，其催化作用是在生理水平上维持细胞内ATP浓度，CK催化作用是可逆的，即在pH9.0时可催化肌酸和ATP生成磷酸肌酸和ADP，为正反应;也可在pH6.7时催化磷酸肌酸和ADP生成肌酸和ATP，为逆反应。其中在中性条件下，逆反应是正反应的2-6倍，即以生成ATP为主，以保证组织细胞所需的能量来自ATP;而正反应有利于线粒体内氧化磷酸化生成的ATP，以磷酸肌酸的形式进入细胞液，供应细胞生理活动的需要。因此肌酸激酶是一个与细胞内能量转运，肌肉收缩，ATP的再生有直接关系的重要激酶。

　CK 是一个二聚体, 有3种同工酶的形式存在: 2个B单体(CK-BB )，2个M单体(CK-MM)，MB的单体混合体(C K-MB)。这3种同工酶分子量相同,催化相同的化学反应, 但其分子结构和来源不同:CK-BB来源于横纹肌, CK-MM来源于大脑和消化道, 而CK-MB来源于心肌。心肌中CK2MB占CK总量的15 %～25 %。所以在心肌损伤, 特别是急性心肌梗(AMI)时,测定CK-MB对AMI的诊断有极大的临床意义。

　二，CK-MB的检测方法和评价

　常规的CK-MB的测定主要采用的是免疫抑制法，它测定的是CK-MB的活力。正常血清中CK同工酶主要为CK-MM,CK-MB和极少量的CK-BB，由于CK-BB的含量极微，可忽略不计，因此此方法假设血清中只有CK-MM和CK-MB。在试剂中加入抗CK-M亚单位的多克隆抗体, 从而抑制CK-MM和CK-MB中M亚单位活性, 测得结果相当于CK-MB中B亚单位活性, 将结果乘以2即相当于CK-MB活力。此方法迅速，简介，省时，有较高的敏感性，但是影响

　因素和缺陷众多。简要讨论如下：

　1.酶易于老化：

　CK-MB活性的酶易于老化，主要表现为酶构象改变。其引起CK-MB活性检测降低或正常的原因可能是由于过了检测时间，以致血清中酶老化使酶的催化活性降低或丧失，从而导致酶的活化能升高所致。

　2.巨CK的干扰：

　巨CK是巨分子酶, 比正常情况下相应的酶有着高分子团, 不被抗CK-M抗血清所抑制, 表现为血清中?CK-MB ?占CK活力50%以上, 而CK活力正常或轻度或中度增高。巨CK大部分情况下是酶与一种免疫球蛋白的复合物, 称巨CK1, 通常免疫球蛋白是IgG 和IgA , 偶见IgM , 当形成复合物时, CK-MB试剂不但不能抑制CK-M , 而且因计算时结果乘以2, 更加扩大了误差; 而巨CK2是一种不正常低聚的线粒体CK,又称CK-Mt, CK-Mt抗原性与CK-M 不同, 抗M抗体不能抑制CK-Mt,故形成CK-MB的假阳性。

　3.CK-BB的干扰：

　免疫抑制法检测CK-MB活性的方法是假定标本中无CK-BB活性。同工酶CK-BB主要存在于脑组织中, 正常情况其在血清中活性很低, 部分脑部疾患、前列腺等组织肿瘤出现时，组织中CK-BB释放进入外周血, 由于CK-BB活性的升高, 必定影响CK-MB测定结果的准确性，造成CK-MB的假阳性。

　4.溶血的干扰：

　测定CK、CK-MB活力尽量不使用溶血标本。众所周知, 红细胞中不含CK, 但红细胞中含有腺苷酸激酶(AK) , AK能直接参与CK速率法的第二步反应, 在没有CK的情况下,A K 可直接与葡萄糖-6磷酸反应在腺苷二磷酸作用下经葡萄糖-6磷酸脱氢酶催化使NAD还原成NADH, 从而引起340nm处吸光度上升, 从上述反应可看出, 即便血清中不含CK, 溶血标

　本中的AK也能直接参与2ADP?ATP +AMP的反应, 故对CK-MB的测定结果也带来一定影响。

　基于以上的事实，推荐以CK-MB的质量法来代替活力测定。质量检测采用吖啶酯作为化学发光示踪物，利用抗CK?MB单克隆抗体标记吖啶酯，抗CK-BB单克隆抗体包被磁微粒，采用双抗体夹心磁微粒化学发光免疫测定CK?MB的浓度。实验证明：加入干扰物(CK-MM和CK-BB)前后CK-MB的质量未见明显变化。说明它不受非典型CK、巨CK和CK-BB等多因素的影响。同时，它也不受酶老化的影响，其检测灵敏度和特异性也高于CK-MB活性检测。因此，对于缺血性心肌损伤患者的临床诊断，相比之下，CK-MB质量检测比CK-MB活性检测更为合适。

　三，CK-MB的临床应用

　1.诊断AMI

　有关实验表明，在症状发生后12～48d时采样分析，CK-MB质量的临床灵敏度和临床特异性分别为96.8%和89.6%，这就使它在众多心肌标志物中脱颖而出，成为对AMI临床诊断起重要作用的一个指标。同时，结合cTnI、Myo等心肌特异标志物可提高临床诊断的准确性。

　2.不稳定型心绞痛(UA)的预后判断

　UA易发展为AMI或猝，由于传统的酶学指标和心电图对一些亚急性心肌梗及小灶性心肌梗等微小心肌损伤的患者难以检出或无特征性改变，使临床医生很难对UA患者进行前瞻性观察并采取相应的措施。临床医生可根据血清CK?MB定量检测结果来判断UA患者的预后情况，方便选择最佳的治疗方案，以期达到最佳的治疗效果。

　3.缺血性心肌损伤的危险分层

　对于缺血性心肌损伤，特别是AMI，为了能了解疾病病情的进程，可利用CK-MB质量

　升高的程度对该疾病进行危险分层，以方便临床医生利用该危险分层建立合理的治疗方案，减轻患者痛苦和经济负担。

　4.监护溶栓效果，确定再灌注

　在缺血性心脏疾病中，当被阻塞的冠脉再通时，心肌中的CK-MB被血流冲刷出来，引起血液中CK-MB质量升高，峰值时间提前。因此我们可通过CK-MB定量检测结果来判断溶栓治疗在短时间内再通与否，确定心肌再灌注以及观察治疗效果等。除此之外，CK-MB质量还可以用于较早期诊断AMI，也可以用于估计梗范围大小或再梗。

　四，心肌酶谱

　心肌酶是存在于心肌的多种酶的总称，一般有乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)，肌酸激酶同工酶(CK-MB)、谷草转氨酶(AST)、?-羟丁酸脱氢酶(?-HBD)。

　1. ?-羟丁酸脱氢酶(?-HBD)

　?-羟丁酸脱氢酶不是一个独立的特异酶，而是含有H亚基的LD-1和LD-2的总称。测定?-羟丁酸脱氢酶，其实际反映的是乳酸脱氢酶同工酶LDH1和LDH2的活性，对诊断心肌疾病和肝病有一定意义。

　?-羟丁酸脱氢酶(?-HBD)正常值：90～220U/L;

　临床意义： (1)升高：

　1)、急性心肌梗、恶性贫血、溶血性贫血、畸胎瘤(LDH/?-HBDH比例增加)。

　2)、白血病、性淋巴瘤、传染性单核细胞增多症 (LDH/?-HBDH比例不增加)。

　(2)降低：

　免疫抑制剂、抗癌剂(LDA也降低)，遗传性变异的LDH-H亚型欠缺症

　(LDH/?-HBDH比值下降)。

　2. 血清谷丙转氨酶(ALT)

　谷丙转氨酶，主要存在于各种细胞中，尤以肝细胞为最，整个肝脏内转氨酶含量约为血中含量的100倍，在各种病毒性肝炎的急性期，药物中毒性肝细胞坏时，ALT大量释放入血中。因此它是诊断病毒性肝炎、中毒性肝炎的重要指标。

　血清谷丙转氨酶(ALT)正常参考值：男性：5～40 U/L;女性：5～35 U/L。

　临床意义

　(1)血清ALT活性增高：

　① 肝胆疾病：传染性肝炎、肝癌、中毒性肝炎、脂肪肝和胆管炎等。

　② 心血管系统疾病：心肌梗、心肌炎、心力衰竭时肝淤血和脑出血等。

　③ 药物和毒物：氯丙嗪、异菸肼、奎宁、水扬酸制剂及乙醇、铅、汞、四氯化碳或有同磷等引起ALT活性增高。

　(2)ALT活性降低：磷酸吡哆醛缺乏症。

　3. 谷草转氨酶(AST)

　谷草转氨酶又名天门冬氨酸氨基转移酶，在心肌细胞中含量最高，所以当心肌细胞受到损伤时，大量的酶释放人血，使血清含量增加，临床一般常作为心肌梗塞和心肌炎的辅助检查，但肝脏损害时其血清浓度也可升高，当谷丙转氨酶(ALT)明显升高，谷丙/谷草比值>1时，就提示有肝实质的损害。

　谷草转氨酶(AST)正常参考值：8～40 U/L。

　临床意义

　病理性升高：

　(1)心肌梗塞发病6～12小时显著升高，增高的程度可反映损害的程度，并在发作后48小时达到最高值，约3～5天恢复正常;

　(2)各种肝病AST可增高，肝病早期和慢性肝炎增高不明显，AST/ALT比值小于1。严重肝病和肝病后期增高，AST/ALT比值大于1;

　(3)其他疾病如心肌炎、肾炎及肺炎等AST也轻度升高。

　4. 乳酸脱氢酶(LDH)

　人组织中的乳酸脱氢酶(LDH)几乎存在于所有组织中，用电泳法可以分离出5种同工酶区带，根据其电泳迁移率的快慢，依次命名为LDH1，LDH2，LDH3，LDH4，LDH5。不同组织的乳酸脱氢酶同工酶分布不同，存在明显的组织特异性，人心肌、肾和红细胞中以LDH1和LDH2最多，骨骼肌和肝中以LDH4和LDH5最多，而肺、脾、胰、甲状腺、肾上腺和淋巴结等组织中以LDH3最多。这些组织中的LDH的活力比血清中高得多。所以当少量组织坏时，该酶即释放血而使其他血液中的活力升高。

　乳酸脱氢酶(LDH)正常参考值：100～240 U/L。

　临床意义：

　① 心肌梗塞：心肌梗塞后9～20h开始上升，36～60h达到高峰，持续6～10天恢复正常(比AST、CK持续时间长)，因此可作为急性心肌梗塞后期的辅助诊断指标。

　② 肝脏疾病：急性肝炎，慢性活动性肝炎，肝癌，肝硬化，阻塞性黄疸等。肿瘤转移所致的胸腹水中LDH往往也升高。

　③ 血液病：如白血病、贫血、恶性淋巴瘤等，LDH升高。

　④ 骨骼肌损伤、进行性肌萎缩、肺梗塞等。

　⑤ 恶性肿瘤转移所致胸、腹水中乳酸脱氢酶活力往往升高。

　⑥ 正常新生儿LDH水平很高，可达775～2000U/L，满月后为180～430 U/L，以后随年龄增长逐渐降低，12岁后趋于恒定。

　由于测定LD的特异性较差，目前临床上多同时测定乳酸脱氢酶同工酶来判断其组织

　来源，用于心肌梗塞、肿瘤、肝病等的诊断。具体诊断如下：

　(1)心肌细胞LD活性远高于血清数百倍，尤以LDH1和LDH2含量最高。急性心肌梗塞时，血清LDH1和LDH2显著升高，约95%的病例的血清LDH1和LDH2比值大于1，且LDH1升高早于LDH总活性升高。病毒性和风湿性心肌炎及克山病心肌损害等，病人的血清LDH同工酶的改变与心肌梗塞相似。LDH1/LDH2比值>1还见于溶血性贫血、恶性贫血、镰形细胞性贫血、肾脏损伤、肾皮质梗塞、心肌损伤性疾病、瓣膜病等。

　(2)脑干含LDH1较高。颇脑损伤仅累及大脑半球时，只有血清同工酶谱的绝对值增高，而不影响同工酶的相互比值，如果累及脑干时，病人血清LDH1的含量也增高。

　(3)胚胎细胞瘤病人的血清LDH1活性升高。

　(4)肝细胞损伤或坏后，向血流释入大量的LDH4和LDH5，致使血中LDH5/LDH4比值升高，故LDH5/LDH4>1可做为肝细胞损伤的指标。急性肝炎以LDH5明显升高，LDH4不增，LDH5/LDH4>1为特征;若血清LDH5持续升高或下降后再度升高，则可认为是慢性肝炎;肝昏迷病人的血清LDH5、LDH4活性极高时，常示预后不良;原发性肝癌以血清LDH4>LDH5较为常见。

　(5)肾皮质以LDH1和LDH2含量较高，肾髓质以LDH4和LDH5活性较强。患急性肾小管坏、慢性肾盂肾炎、慢性肾小球肾炎以及肾移植排异时，血清LDH5均可增高。

　(6)肺含LDH3较多，肺部疾患时血清LDH3常可升高。肺梗塞时LDH3和LDH4相等，LDH1明显下降;肺脓肿病人的血清LDH3、LDH4常与LDH5同时升高。

　(5)肌营养不良病人肌肉中LDH1、LDH2明显增高，LDH5显著下降;而血清则相反，LDH1、LDH2明显减少，LDH4、LDH5显著，表明血清LDH同工酶主要来自肌肉组织。煤矿、钨矿矽肺病人的血清LDH1、LDH2下降，LDH4、LDH5升高。

灵敏度评估资料是评价拟上市产品有效性的重要依据，也是产品注册所需的重要申报材料之一。

灵敏度的定义可以理解为体外诊断试剂对待测样本所能检测到的最小量，有两个含义：①最小浓度或含量的变化可以引起检测信号的显著变化；②具有适当的限度检测出区别于零的待测物的最小浓度或含量。

体外诊断试剂的分析灵敏度也称为检测限，指检测方法可检测到的最低检测浓度，即在统计学意义上能与零剂量区别的量。一般用95％可信限计算：重复测定空白样本20次，计算20次反应测得的均值和标准差（SD），以平均值+2SD（夹心法）或平均值-2SD（竞争法）计算出相应的浓度，即为体外诊断试剂的分析灵敏度，也是注册资料所需提供的内容。

1.分析灵敏度评估需要的材料和基本要求：

空白样本的制备：空白样本应不含被测物，但其基质应与带测定常规样本相同。如空白样本难以获得，可采用5%牛血清或人血清白蛋白溶液，或根据具体项目选择相应基质的样本，但是需要注意的是，要将基质效应减到最小。

2.实验方法：

在一次运行中重复测定空白样本20次。

3.数据处理：

1）数据记录：将结果记录于表格。如果检测系统对于低于零的报告为零，应记录初始响应值。

2）数据统计：计算20次平均值和标准差SD

3）标准差计算公式：

4）结果报告：

分析灵敏度 =?平均值+2SD（夹心法）或平均值-2SD（竞争法）

体外诊断试剂的功能灵敏度与精密度相关，是以天间变异系数（CV）为20%时所对应的检测限样本具有的平均浓度。

1.计算方法：