关于吖啶酯化学发光反应的特点-吖啶酯化学发光法是几代
直接参与发光反应的标记物主要是具有在化学结构上能产生发光特殊基团的物质。这类物质在发光免疫分析过程中直接参与发光反应,不需要通过催化反应或能量传递来间接发光。根据公开发布的信息,以下是一些直接参与发光反应的标记物:
1. 吖啶酯类标记物
特点:吖啶酯类标记物在化学结构上有产生发光的特殊基团,它们通过起动发光试剂的作用而发光,能够在极短的时间内(如1秒内)完成强烈的直接发光,为快速的闪烁发光。
应用:吖啶酯作为标记物用于免疫分析,其化学反应简单、快速、无需催化剂。检测小分子抗原常采用竞争法,大分子抗原则采用夹心法,非特异性结合少,本底低。此外,与大分子的结合不会减小所产生的光量,从而增加了灵敏度。
2. 其他可能的直接发光标记物
虽然吖啶酯类标记物是最常见的直接参与发光反应的标记物之一,但也可能存在其他类型的直接发光标记物。然而,需要注意的是,并非所有发光标记物都直接参与发光反应,有些可能通过催化反应或能量传递来间接发光。
3. 间接参与发光反应的标记物
酶标记物:如辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(ALP),它们作为发光反应的催化剂或能量传递过程中的受体,通过催化底物发光或参与能量传递来间接发光。
非酶标记物:如三联吡啶钌等,它们可能作为化学反应的催化剂或能量传递过程中的中间体,但不直接参与发光反应,而是通过能量传递等方式影响发光强度。
综上所述,直接参与发光反应的标记物主要是具有在化学结构上能产生发光特殊基团的物质,如吖啶酯类标记物。在化学发光免疫分析中,选择合适的标记物对于提高检测的灵敏度和特异性至关重要
使用吖啶酯标记抗原或抗体的自动化免疫分析仪器设计原理是
吖啶酯:ā dìng。
如果吖啶环上的取代基能与吖啶环上的C-9 和H2O2形成不稳定的二氧乙烷(此二氧乙烷可迅速分解为CO2 和电子激发态的N - 甲基吖啶酮,当回到基态时发出光子),则这类取代吖啶化合物可做为化学发光标记物。
根据取代基的不同,常用作化学发光标记物的吖啶取代物分为两类:吖啶酯和吖啶磺酰胺。它们的结构中都有共同的吖啶环。
它们的发光机理相同:在碱性H2O2 溶液中,分子受到过氧化氢离子进攻时,生成不稳定的二氧乙烷,此二氧乙烷分解为CO2 和电子激发态的N - 甲基吖啶酮,当其回到基态时发出最大发射波长为430nm 的光子。
吖啶酯或吖啶磺酰胺类化合物应用于化学发光免疫分析,通常采用的体系是Acridinium ester/ H2O2 系统。
即用吖啶酯或吖啶磺酰胺标记抗体或抗原,用HNO3+ H2O2 和NaOH 作发光启动试剂。有些在发光启动试剂中加入Triton X - 100 , CTAC , Tween - 20 等表面活性剂以增强发光。
化学发光免疫分析仪的发光试剂
正确答案是:C.化学发光免疫测定原理。
吖啶酯化学发光法属于化学发光免疫分析,其原理是利用抗原-抗体反应,将吖啶酯直接标记在抗原或抗体上,与待测样本中的相应抗体或抗原结合后,在H2O2和NaOH存在下,可发生化学发光反应,通过光电倍增管将化学发光转化为光子,由光子计数器进行光电转换并进行测定(C对)。
化学发光法检测现在普遍吗?目前我国有多少生产化学发光法检测试剂盒的厂家?
HRP 标记的CLEIA常用的底物为鲁米诺(32氨基邻苯二甲酰肼,lum ino l) ,或其衍生物如异鲁米诺(42氨基邻苯二甲酰肼) , 是一类重要的发光试剂。其结构如图4 所示。鲁米诺的氧化反应在碱性缓冲液中进行,在过氧化物酶及活性氧[ 过氧化阴离子(O 2- ) , 单线态氧(1O 2 ) , 羟自由基(OH·) , 过氧化氢(H2O 2)]存在下,生成激发态中间体, 当其回到基态时发光, 其波长为425nm。
早期用鲁米诺直接标记抗原(或抗体) ,但标记后发光强度降低而使灵敏度受到影响。近来用过氧化物酶标记抗体, 进行免疫反应后利用鲁米诺作为发光底物, 在过氧化物酶和起动发光试剂(NaOH2H2O 2) 作用下, 鲁米诺发光, 发光强度依赖于酶免疫反应物中酶的浓度。Kodak Am erliteTM半自动分析系统就是利用这一体系专门设计的。
很好啊,普遍认为是替代酶免法的方法学。
1.酶促反应 标记鲁米诺 这种技术国产的基本上掌握了,用96孔板的,和酶免差不多。半自动机器多一些,所谓的全自动是拼接的类似全自动酶免。代表是郑州安图,潍坊康华,北京源德这些
2.磁微粒的 表吖啶酯 通俗叫管式发光,代表是贝克曼、雅培、西门子的设备+试剂,国产的新产业、威高、迈克这些技术还很不成熟,机器返修率吓人,但是试剂便宜很多。
3.电化学发光 目前只有罗氏有,三甲医院里占有率高,相对稳定。但是试剂成本太高。
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