吖啶酯直接化学发光液-吖啶酯的发光底物

1、直接化学发光，标记物为吖啶酯（雅培）或者ABEI（新产业）

2、酶促化学发光，标记物为碱性磷酸酶（厦门波生）或者辣根过氧化物酶（强生）

3、电化学发光，标记物为三联吡啶钌（罗氏）

注：括号内为代表厂家。

简介：

化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA),是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合，用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。是继放免分析、酶免分析、荧光免疫分析和时间分辨荧光免疫分析之后发展起来的一项最新免疫测定技术。

作吖啶酯化学发光实验时，发光强度太小是什么原因？

HRP 标记的CLEIA常用的底物为鲁米诺(32氨基邻苯二甲酰肼,lum ino l) ,或其衍生物如异鲁米诺(42氨基邻苯二甲酰肼) , 是一类重要的发光试剂。其结构如图4 所示。鲁米诺的氧化反应在碱性缓冲液中进行,在过氧化物酶及活性氧[ 过氧化阴离子(O 2- ) , 单线态氧(1O 2 ) , 羟自由基(OH·) , 过氧化氢(H2O 2)]存在下,生成激发态中间体, 当其回到基态时发光, 其波长为425nm。

早期用鲁米诺直接标记抗原(或抗体) ,但标记后发光强度降低而使灵敏度受到影响。近来用过氧化物酶标记抗体, 进行免疫反应后利用鲁米诺作为发光底物, 在过氧化物酶和起动发光试剂(NaOH2H2O 2) 作用下, 鲁米诺发光, 发光强度依赖于酶免疫反应物中酶的浓度。Kodak Am erliteTM半自动分析系统就是利用这一体系专门设计的。

发光物吖啶酯标记的化学发光反应体系应在何种环境中进行

导致吖啶酯化学发光实验中发光强度太小的可能原因有多种，以下是其中的一些常见因素：

激发光源的能量不足：如果激发光源的能量不足，无法有效激发化学发光反应，导致发光强度较低。解决这个问题的方法是更换更高能量的激发光源。

溶液的浓度过低：如果溶液的浓度过低，化学发光反应产生的发光信号也会相应较弱。可以通过适当增加溶液浓度来提高发光强度。

反应介质的影响：反应介质可能会影响化学发光反应的进行，进而影响发光强度。可以通过优化反应介质来提高发光强度，例如调节介质的pH值、离子浓度等。

反应时间的控制：如果反应时间过短，可能会导致化学发光反应没有完全进行，从而影响发光强度。可以通过适当延长反应时间来提高发光强度。

温度的影响：温度对化学反应的影响非常大，如果温度过高或过低都可能影响化学发光反应的进行，进而影响发光强度。可以通过控制实验过程中的温度来提高发光强度。

需要注意的是，以上因素可能并不是单一原因导致发光强度太小，也可能是多个因素共同作用的结果。因此，在实际实验过程中，需要综合考虑各种因素，通过逐一排查和优化来提高化学发光实验的发光强度。

使用吖啶酯标记抗原或抗体的自动化免疫分析仪器设计原理是

正确答案是：E.碱性或中性。

吖啶酯在碱性或中性环境（pH7～9）（E对）发生化学发光反应，其发光强度与吖啶酯及氢过氧化物浓度成正比。

电化学发光免疫测定的底物是（　　）。

正确答案是：C.化学发光免疫测定原理。

吖啶酯化学发光法属于化学发光免疫分析，其原理是利用抗原-抗体反应，将吖啶酯直接标记在抗原或抗体上，与待测样本中的相应抗体或抗原结合后，在H2O2和NaOH存在下，可发生化学发光反应，通过光电倍增管将化学发光转化为光子，由光子计数器进行光电转换并进行测定（C对）。

答案：C

吖啶酯常用于直接标记发光；HRP标记的化学发光免疫分析的发光底物为鲁米诺；碱性磷酸酶标记的化学发光免疫分析的发光底物为AMPPD；三联吡啶钌用于电化学发光免疫分析。