吖啶酯化学发光试剂盒研制-吖啶酯发光原理

1、直接化学发光，标记物为吖啶酯（雅培）或者ABEI（新产业）

2、酶促化学发光，标记物为碱性磷酸酶（厦门波生）或者辣根过氧化物酶（强生）

3、电化学发光，标记物为三联吡啶钌（罗氏）

注：括号内为代表厂家。

简介：

化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA),是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合，用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。是继放免分析、酶免分析、荧光免疫分析和时间分辨荧光免疫分析之后发展起来的一项最新免疫测定技术。

化学发光标记免疫测定中常用的发光底物为

吖啶酯和三联吡啶钌。

吖啶酯是一类可用作化学发光标记物的化学物质，加入发光启动试剂后0.4s左右发射光强度达到最大，半衰期为0.9s左右。

三联吡啶钌其标记物的发光原理是，一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应。

化学发光免疫分析仪的发光试剂

答案：A

1.化学发光酶免疫测定以过氧化物酶为标记酶，以鲁米诺为发光底物。

2.吖啶酯是化学发光免疫测定中较为理想的发光底物，在碱性环境中即可被过氧化氢氧化而发光。

3.电化学发光免疫测定中常用的发光底物为三联吡啶钌。

化学发光法检测现在普遍吗？目前我国有多少生产化学发光法检测试剂盒的厂家？

HRP 标记的CLEIA常用的底物为鲁米诺(32氨基邻苯二甲酰肼,lum ino l) ,或其衍生物如异鲁米诺(42氨基邻苯二甲酰肼) , 是一类重要的发光试剂。其结构如图4 所示。鲁米诺的氧化反应在碱性缓冲液中进行,在过氧化物酶及活性氧[ 过氧化阴离子(O 2- ) , 单线态氧(1O 2 ) , 羟自由基(OH·) , 过氧化氢(H2O 2)]存在下,生成激发态中间体, 当其回到基态时发光, 其波长为425nm。

早期用鲁米诺直接标记抗原(或抗体) ,但标记后发光强度降低而使灵敏度受到影响。近来用过氧化物酶标记抗体, 进行免疫反应后利用鲁米诺作为发光底物, 在过氧化物酶和起动发光试剂(NaOH2H2O 2) 作用下, 鲁米诺发光, 发光强度依赖于酶免疫反应物中酶的浓度。Kodak Am erliteTM半自动分析系统就是利用这一体系专门设计的。

发光物吖啶酯标记的化学发光反应体系应在何种环境中进行

很好啊，普遍认为是替代酶免法的方法学。

1.酶促反应 标记鲁米诺 这种技术国产的基本上掌握了，用96孔板的，和酶免差不多。半自动机器多一些，所谓的全自动是拼接的类似全自动酶免。代表是郑州安图，潍坊康华，北京源德这些

2.磁微粒的 表吖啶酯 通俗叫管式发光，代表是贝克曼、雅培、西门子的设备+试剂，国产的新产业、威高、迈克这些技术还很不成熟，机器返修率吓人，但是试剂便宜很多。

3.电化学发光 目前只有罗氏有，三甲医院里占有率高，相对稳定。但是试剂成本太高。

查厂家去SFDA网站，数据查询，非常方便!

正确答案是：E.碱性或中性。

吖啶酯在碱性或中性环境（pH7～9）（E对）发生化学发光反应，其发光强度与吖啶酯及氢过氧化物浓度成正比。