吖啶酯的发光底物是什么-吖啶酯化学发光的缺点

答案：B

A项，吖啶酯类是目前常用的直接标记发光剂。BD两项，目前化学发光酶免疫测定中常用的标记酶有辣根过氧化物酶（HRP）和碱性磷酸酶（ALP）。辣根过氧化物酶催化的发光剂为鲁米诺及其衍生物；碱性磷酸酶催化的发光底物为AMPPD。C项，三联吡啶钌是电化学发光剂。E项，4-MUP（4-甲基伞酮磷酸盐）是碱性磷酸酶反应的荧光底物。化学发光酶免疫测定中常用来标记抗原或抗体的物质是鲁米诺。

萤火虫荧光素酶（Luciferase）标记肿瘤细胞活体成像技术的方法介绍

化学发光反应要满足什么条件

发光有两种,一种是由于温度达到条件而发光,一种是冷光,也就是是荧光.高于绝对零度的物体都会向周围空间发射电磁波,温度越高发射的电磁波的波长越短.当波长范围落在可见光范围内时就会发光.另外,高速运动的物体也会发射波长较短的电磁波.一般化学发光要么是温度的关系（大部分情况是燃烧）,要么就是荧光反应---发光基团吸收能量使电子跃迁到高能级,在一定条件下释放电磁波的现象

很高兴为你解答有用请采纳

化学发光免疫分析包含两个部分，即免疫反应系统和化学发光分析系统。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化，形成一个激发态的中间体，当这种激发态中间体回到稳定的基态时，同时发射出光子(hM)，利用发光讯号测量仪器测量光量子产额。免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体)直接标记在抗原(化学发光免疫分析)或抗体(免疫化学发光分析)上，或酶作用于发光底物。化学发光免疫分析根据其所采用的标记物的不同可分为发光物标记、酶标记和元素标记化学发光免疫分析三大类。发光物标记的CLIA是以发光物质代替放射性核素或酶作为标记物(如吖啶酯)，在反应体系中发光物质在碱性介质中氧化时释放大量自由能，产生激发态的中问体，该激发态的中间体由最低振动能级回到稳定的基态，各个振动能级产生辐射时，同时产生能量，多余的能量即为发射光子，从而产生发光现象。利用发光讯号的测量仪器，分析接收的光量子产额，通过计算机系统转换成被测物质的浓度单位。在此系统中包含两个部分，化学发光反应系统和免疫反应系统，即在抗原一抗体特异性反应过程中，伴随有化学反应过程而产生光的发射现象。化学反应系统中以化学反应为基础，化学发光的首要条件是吸收了化学能而处于激发态的分子或原子必须能释放出光子或者能将能量转移到另一个物质的分子上并使这种分子激发，当这种分子回到基态时释放出光子。化学发光与荧光的根本区别是形成激发态分子的激发能原理不同。荧光是发光物质吸收了激发光后使分子产生发射光；化学发光是化学反应过程中所产生的化学能使分子激发产生的发射光。因此，化学发光反应过程必须产生足够的激发能是产生发光效应的重要条件。化学发光反应可在气相、液相或固相反应体系中发生，以液相发光在免疫学检测中最常应用。

发光有两种，一种是由于温度达到条件而发光，一种是冷光，也就是是荧光。高于绝对零度的物体都会向周围空间发射电磁波，温度越高发射的电磁波的波长越短。当波长范围落在可见光范围内时就会发光。另外，高速运动的物体也会发射波长较短的电磁波。一般化学发光要么是温度的关系（大部分情况是燃烧），要么就是荧光反应---发光基团吸收能量使电子跃迁到高能级，在一定条件下释放电磁波的现象

化学中..置换反应要满足哪些条件？

置换反应也就是氧化还原的一种，单质和一种化合物生成另一种单质和化合物，一般都是金属来置换另一种金属，只需比较反应物金属的还原性，可以根据周期表的规律或K，CA，NA，MG，AL。。。。

辣根酶催化鲁米诺化学发光反应?

消毒液啊~漂白剂啊~~拿这之类的东西好好地洗一遍有血的东西就能 干扰 鲁米诺鉴定。 所以说想干坏事一定要好好蓄谋。 以下摘自百度百科： 鲁米诺的缺点 1、鲁米诺在铜、含铜合金、辣根或某些漂白剂的存在下发出荧光。因此如果犯罪现场被漂白剂彻

置换反应要满足哪些条件？

一种单质与一种化合物反应,生成另一种单质和另一种化合物的反应叫做置换反应,

只有当一种单质和一种化合物反应能产生气体或沉淀或水,这个反应就认为可以发生.

最典型的置换反应就是金属单质与稀酸生成氢气的反应。

置换反应发生的条件:

1.金属+酸:金属活动顺序H前金属可以置换酸中的H,酸不能是硝酸和浓硫酸 。

2.金属+盐:金属活动顺序前换后,盐必须是可溶盐。

3.H2和C与金属氧化物:条件是加热或高温。

常见的化学发光反应体系有那些？

最常见的是鲁米诺及其衍生物-过氧化氢体系

其次，吖啶脂类如光泽精-过氧化氢体系

二氧杂环丁烷类如AMPPD在碱性磷酸酶ALP的催化下分解

然后，还有过氧化草酰酯+染料体系，钌联吡啶+TPA体系等等。

除此之外还有很多，像鲁米诺体系里的氧化剂未必只有过氧化氢，还有高锰酸钾、Br2、甲醛等等。催化剂也可以是过氧化物酶或者过渡金属离子

还有就是诸如乙醇蒸汽、异丙醇蒸汽这些，在奈米金属粒子上也是可以产生催化化学发光的。

化学发光 电化学发光

应该是吧 发光都是电化学方面的~

标记用的化学发光剂应符合什么条件

应满足：

能参与化学发光反应；与抗原或抗体偶联后能形成稳定的结合物试剂；偶联后仍保持高的量子效应和反应动力；应不改变或极少改变被标记物的理化性质，特别是免疫活性。

化学发光

化学发光是指物质在进行化学反应时，由于吸收了反应时产生的化学能，而使反应物产物分子激发至激发态，受激发分子由激发态回到激发态时，便发出一定波长的光。

高锰酸钾是化学发光反应中常用的强氧化剂，它可以和分子结构中含有多个羟基或氨基的有机物发生化学发光反应。

化学发光剂的常用发光剂

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，许多大中型城市，乳腺癌已居女性恶性肿瘤亡率的首位。乳腺癌复发转移是导致乳腺癌患者亡的最主要原因，淋巴结阴性的患者中约有24%～30%出现复发转移，淋巴结阳性的患者中复发转移率高达50%～60%，而转移性乳腺癌的5年生存率仅为26%。

萤火虫荧光素酶（Luciferase）是一种常用的信号分子，可以用来标记肿瘤细胞.

一．细胞方法

将带有荧光素luc转酶报告基因的真核表达重组质粒pRc/CMV2-7，利用G418筛选，获得稳染人乳腺癌细胞株MCF-7-luc，并在稳定表达荧光素酶基因的细胞克隆MCF-7体外评价其发光能力。通过建立裸鼠移植瘤模型，利用活体生物发光成像系统检测肿瘤生长及转移情况，为下一步监测裸鼠移植瘤对药物作用的变化情从而为分析药物对肿瘤的治疗效果提供理想的状况.

G418筛选浓度的确定：

37℃细胞培养箱中常培养,G418按0、200、400、600、800、1000μg/ml设置6个浓度梯度。在细胞接种24h后，加入6孔板中，每个浓度设2个孔在10～14d内全部亡。每天观察细胞生长情况，亡最低的G418浓度，即为筛选质粒转染克隆MCF－7细胞的浓度。

1)细胞转染

取对数生长期的MCF－7细胞，将细胞接种于6孔板内待细胞融合度达到80%～90%孔培养板中，TM即可转染。按照Lipofectamine2000试剂盒操作指南进行转染。在250μl无血清、无双抗的DMEM培培养基中加入luc质粒8μg/ml的pRc/CMV2-在250μl无血清、无双抗的DMEM培养基中加入10μlLipofectamineTM2000，室温培育5min。将上述2种稀释液混匀，室温培育30min后加入细胞孔板中，置于培养箱常规培养。

转染24h后胰酶消化细胞并按1∶6比例接种到新6孔板中，同时加入实验确定的浓度G418，随后每2d更换一次培养基并维持G418筛选直至单细胞抗性克隆的出现。分别挑选单一抗性克隆至96孔板，待其逐渐增殖后转入24孔板中继续传代培养。

3)荧光素酶活性鉴定阳性克隆

单一抗性克隆传代至第五代时用LuciferaseAs-sayAystem检测荧光素酶活性。检测时，各克隆按1×105个/孔接种到24孔板，24h后细胞裂解液裂解12000rpm，4℃离心10min，收集裂解物，取上清10μl加入96孔白板中，向每孔加入50μl荧光素酶96microplateluminometer连续读底物，停留2s后，取10s的荧光值（RLU），每个克隆设3个复孔，保留RLU值高的细胞克隆继续传代培养，再过5代后进行荧光素酶活性检测。保留RLU值维持较高的克隆直至第30代，荧光素酶活性最高的几个克隆MCF-7-luc即为阳性克隆.

各不同数量细胞克隆的荧光值检测7-luc阳性克隆细胞按细胞数将筛出的MCF-4×104、2×104、1×104、5000、2500、1250、625、312和156分别接种到96孔黑板中，另外一组仅有细胞，一组仅有培养基作对照，设置2个复孔，常规培去上清并用PBS洗两次，每孔加入100μl养24h后，Luciferin使其终浓度为150μg/ml，PBS，再加入D-立即用活体成像系统检测，分析发光强度与细胞数之间的相关性。

4)细胞生长曲线绘制

MCF7-luc细胞和作为对照取表达荧光素酶的MCF-7细胞，接种于24孔板，接种密度为2×104/孔。细胞接种后1～7d，每天胰蛋白酶消化其中3孔细胞，用细胞计数仪测定细胞数。以细胞生长天数为横坐标，细胞数目为纵坐标，分别绘制两种细胞生长曲线。

二．动物模型

BLAB/c裸鼠皮下移植瘤模型的建立BLAB/cnu/nu裸鼠，4～5周龄，体重（15±2）g，雌雄各3只。取对数生长期的MCF-7用PBS重悬为2．5×10/ml悬液，每只裸鼠左右背侧近腋部皮下接种100μl，共接种6只。接种后第5d采用德国BERTHOLD公司的活体成像系统检测信号强度。以后每5d观测一连续观测30d。观测前每只裸鼠戊巴比妥钠麻醉（计量为：35mg/kg体重），按150mg/kg体重的量腹腔注射luciferin（invivograde），10min后，进行活体成像观察皮下肿瘤的生长情况，定量分析各时间点的荧光值。绘制肿瘤皮下生长曲线.

MCF-7-luc细胞裸鼠皮下移植瘤的病理形态学观察

MCF-7-luc细胞裸鼠皮下接种后25d，脱颈处小鼠，取肿瘤组织，制成石蜡切片，切片厚度为3μm，经HE染色后观察细胞的病理形态学。

活体动物成像技术是近期发展起来的一种新型稳定可靠,是检测动物体内分子及细胞事件的影像检测技术，强有力手段。利用生物发光成像（BLI）可以对活体病灶的大小进行无损伤直观准确检测。

我们有自己的独立有机合成实验室，可以生产合成各种化学发光试剂，我们可以提供化学发光试剂、化学发光底物、发光标记物、发光增强剂、染料探针类、微生物和酶的显色底物以及体外诊断试剂。

相关列表

鲁米诺/3-氨基苯二甲酰肼/发光氨

异鲁米诺/4-氨基邻苯二甲酰肼

吖啶酯DMAE-NHS

吖啶酰肼NSP-SA-ADH

吖啶酯ME-DMAE-NHS

哌嗪-N,N'-二(2-乙磺酸)PIPES

磷酸烯醇丙酮酸三(环已胺)盐PEP

病毒保存液

肝素锂

乙二胺四乙酸二钾/EDTA二钾

血清分离胶/血液分离胶

肝素抗凝剂

乙二胺四乙酸三钾/EDTA三钾

血液促凝剂

高效促凝粉

高效硅化剂

水溶性硅化剂

草酸钾

钙离子螫合抗凝剂

弱效抗凝剂

吖啶酯己二酰阱NSP-DMAE-ADH

吖啶酯-T4结合物

吖啶酯-T3结合物

吖啶磺酰胺盐-N-乙胺基马来酰亚胺

吖啶磺酰胺盐-T4结合物

吖啶磺酰胺盐-T3结合物

生物素-T4结合物

化学发光分析试剂及标记物

生物素-T3结合物

生物素-NHS活性酯

吖啶磺酰胺NSP-SA-ADH

吖啶酯NSP-DMOAE-NHS

吖啶酯NSP-DMOAE-PEG-GT-NHS

Cy3-NHS酯

Cy7-NHS酯

5-羧基荧光素-NHS酯

6-羧基荧光素-NHS酯

5(6)-羧基荧光素-NHS酯

6-羧基荧光素

D荧光素钠盐 D-Luciferin, Sodium Salt

D-荧光素钾盐 D-Luciferin, Potassium Salt

D-荧光素萤火虫，游离酸 D-Luciferin Firefly, free acid

萤火虫荧光素酶firefly luciferase

海肾荧光素酶Renilla luciferase

天然腔肠荧光素

Coelenterazine h 腔肠素h

Coelenterazine f 腔肠素f

Coelenterazine h/ 腔肠素h

腔肠荧光素

酶促反应的发光底物

酶促反应的发光底物是指经酶的降解作用而发出光的一类发光底物，目前化学发光酶免疫技术中常用的酶有辣根过氧化物酶（HRP）和碱性磷酸酶（AP）。HRP的发光底物为鲁米诺或其衍生物和对-羟基苯乙酸。AP的发光底物为3-（2-螺旋金刚烷-4-甲氧基-4-甲基-4-（3-磷酸氧基）-苯基-1，2-二氧乙烷（AMPPD）和4-甲基伞形酮磷酸盐（4-MUP，荧光底物）。

（1）.鲁米诺或其衍生物。 鲁米诺的氧化反应在碱性缓冲液中进行，通常以0.1mol/L pH8.6Tris缓冲液作底物液。要注意是:首先,鲁米诺和H2O2在无HRP催化时也能缓慢自发发光，而在最后光强度测定中造成空白干扰，因而宜分别配制成2瓶试剂溶液，只在用前即刻混合;其次, HRP发光增强剂如某些酚试剂（如邻－碘酚）或萤火虫荧光素酶可增强HRP催化鲁米诺氧化的反应和延长发光时间，提高发光敏感度。

（2）.对-羟基苯乙酸（HPA)。 对-羟基苯乙酸（HPA）在H2O2存在下被HRP氧化或氧化二聚体（荧光物质），在350nm激发光作用下，发出450nm波长的荧光，可用荧光光度计测量。

（3）.AMPPD。 AMPPD在碱性条件下，被ALP酶解生成相当稳定的AMP-D阴离子，其有2-30min的分解半衰期，发出波长为470nm的持续性光，在15min时其强度达到高峰，15-60min内光强度保持相对稳定。

（4）4-MUP。 4-MUP被ALP催化生成4-甲基伞形酮，在360nm的激发光的作用下，发出448nm的荧光，用荧光光度计进行测量。

直接化学发光剂

直接化学发光剂不需酶的催化作用，只需改变溶液的pH等条件就能发光的物质，如吖啶酯（acridinium, AE）在有过氧化氢的稀碱溶液中即能发光。

电化学发光剂

电化学发光剂是指通过在电极表面进行电化学反应而发出光的物质。化学发光剂三联吡啶钌[Ru(bpy)3]2+（图16-7）和电子供体三丙胺（TPA）在阳性电极表面可同时失去一个电子而发生氧化反应。二价的[Ru(bpy)3]2+被氧化成三价，成为强氧化剂，TPA失去电子后被氧化成阳离子自由基TPA+，它很不稳定，可自发地失去一个质子（H+），形成自由基TPA.，成为一种很强的还原剂，可将一个高能量的电子递给三价的[Ru(bpy)3]3+使其形成激发态的[Ru(bpy)3]2+.。激发态的三联吡啶钌不稳定，很快发射出一个波长为620nm的光子，回复到基态的三联吡啶钌。这一过程可在电极表面周而复始地进行，产生许多光子，使光信号增强。