吖啶橙的染色和产生荧光的原理-吖啶橙染色法在膀胱癌无创诊断中的应用

1.脱落细胞学检查

可多次重复，但早期肿瘤阳性率较低。

（1）流式细胞检查该方法能测定肿瘤DNA含量非整倍体细胞数，对原位癌及高期高级肿瘤的诊断准确率较高，可达90%。

（2）吖啶橙试验肿瘤细胞以吖啶橙荧光素浸染，荧光显微镜观察，能显示出细胞内核糖核酸（RNA）和脱氧核糖核酸（DNA）量变图像，亦能显示细胞的形态结构，有助于判断肿瘤细胞及其活力状态。

2.肿瘤标记物

对于肿瘤生物学行为的判断有预测意义。

（1）膀胱移行细胞癌抗原（BTA）膀胱移行细胞癌分泌蛋白水解酶，将膀胱基底膜降解为Ⅳ型胶原、纤维蛋白连接素和层黏蛋白等基本成分。这些降解产物被排到邻近尿液中，形成基底膜复合物，即所谓膀胱移行细胞癌抗原（BTA）。其成分为相对分子质量为16000～165000的特异多肽。BTA试剂是检测膀胱移行细胞癌膜抗原的方法，对移行细胞上皮癌具有较高的敏感度和特异性。

（2）LewisX抗原检测LewisX是一种ABO血型相关抗原，在正常尿路上皮中不存在该抗原，而5%～89%的移行细胞癌可检出LewisX，且与肿瘤的分级无关。

（3）核基质蛋白22（NMP22）NMP22是核有丝分裂器蛋白，膀胱移行细胞癌细胞内NMP22是正常细胞的25倍以上，诊断膀胱癌的敏感性为48%～90%，特异性为70%～92%。NMP22对高级、高期膀胱癌敏感性较高，在无结石、炎症等情况下，可用于随访监测。

（4）纤维蛋白/纤维蛋白降解产物（FDP）用快速免疫检测法测定尿中FDP，诊断膀胱癌的敏感性为68%，对T2～T4期膀胱癌的敏感性更是高达100%。

（5）玻璃酸酶检测玻璃酸酶是一种细胞外降解基质透明质酸的内源性糖苷酶，在肿瘤进展中起重要作用。应用凝胶技术检测G2、G3级膀胱癌尿液中玻璃酸酶活性，敏感性达92%～100%。

（6）端粒酶活性端粒是位于染色体末端的保护性结构，随细胞分裂逐步缩短，直至细胞亡。端粒酶的作用就是延长端粒。现已发现多种肿瘤细胞中端粒酶活性增强。该法诊断包括低级、低期肿瘤在内的膀胱癌，敏感性可达91%。

3.影像学检查

（1）B超①经腹途径最常用，可以获得肿瘤的大小、数目、位置和基底部宽窄的基本图像，对A期和C期的鉴别提供依据。该检查对膀胱癌术前临床分期与术后病理学检查结果的符合率高达90%～94%。缺点是对肿瘤浸润较深及膀胱周围盆腔脏器的情况显示不足。

（2）排泄性尿路造影（IVU）同时可明确上尿路情况，肿瘤较大者在膀胱区可发现充盈缺损。

（3）CT、MRICT是对于膀胱癌的诊断和临床分期最准确的无创性检查，除了可以确定肿瘤的大小及在膀胱壁浸润的深度外，还可提供关于盆腔及腹膜后淋巴结有无转移、肝或肾上腺有无转移的信息。对膀胱憩室内癌与膀胱壁内癌的诊断有特殊意义。增强CT及螺旋CT扫描可增加分期的准确性。MRI可提供多种断面的影像，因而可以提供更好的局部解剖结构关系。

4.膀胱镜检查

是确诊膀胱移行细胞癌最重要的方法，可以明确是否有肿瘤，以及数目、大小、形态、蒂的部位等情况，并可进行活检。