发光物吖啶酯标记的化学发光反应体系-吖啶类发光材料是什么
两类
1.化学发光标记免疫分析法
化学发光标记免疫分析又称化学发光免疫分析(CL IA ) ,是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析方法。常用于标记的化学发光物质有吖啶酯类化合物——acridin ium ester (A E) ,是有效的发光标记物[ 3 ] , 其通过起动发光试剂(N aOH2H2O 2 ) 作用而发光, 强烈的直接发光在一秒钟内完成,为快速的闪烁发光(见图1)。吖啶酯作为标记物用于免疫分析, 其化学反应简单、快速、无须催化剂; 检测小分子抗原采用竞争法 ,大分子抗原则采用夹心法 , 非特异性结合少, 本底低; 与大分子的结合不会减小所产生的光量, 从而增加灵敏度。
2.发光酶免疫分析法
从标记免疫分析角度, 化学发光酶免疫分析( chem ilum inescen t enzym e imm unoassay,CL E IA ) , 应属酶免疫分析, 只是酶反应的底物是发光剂,操作步骤与酶免分析完全相同[ 5 ]: 以酶标记生物活性物质(如酶标记的抗原或抗体) 进行免疫反应, 免疫反应复合物上的酶再作用于发光底物,在信号试剂作用下发光, 用发光信号测定仪进行发光测定。目前常用的标记酶为辣根过氧化物酶(HRP) 和碱性磷酸酶(AL P) ,它们有各自的发光底物。
化学发光免疫分析法有哪三类
HRP 标记的CLEIA常用的底物为鲁米诺(32氨基邻苯二甲酰肼,lum ino l) ,或其衍生物如异鲁米诺(42氨基邻苯二甲酰肼) , 是一类重要的发光试剂。其结构如图4 所示。鲁米诺的氧化反应在碱性缓冲液中进行,在过氧化物酶及活性氧[ 过氧化阴离子(O 2- ) , 单线态氧(1O 2 ) , 羟自由基(OH·) , 过氧化氢(H2O 2)]存在下,生成激发态中间体, 当其回到基态时发光, 其波长为425nm。
早期用鲁米诺直接标记抗原(或抗体) ,但标记后发光强度降低而使灵敏度受到影响。近来用过氧化物酶标记抗体, 进行免疫反应后利用鲁米诺作为发光底物, 在过氧化物酶和起动发光试剂(NaOH2H2O 2) 作用下, 鲁米诺发光, 发光强度依赖于酶免疫反应物中酶的浓度。Kodak Am erliteTM半自动分析系统就是利用这一体系专门设计的。
化学发光标记免疫测定中常用的发光底物为
1、直接化学发光,标记物为吖啶酯(雅培)或者ABEI(新产业)
2、酶促化学发光,标记物为碱性磷酸酶(厦门波生)或者辣根过氧化物酶(强生)
3、电化学发光,标记物为三联吡啶钌(罗氏)
注:括号内为代表厂家。
简介:
化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA),是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合,用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。是继放免分析、酶免分析、荧光免疫分析和时间分辨荧光免疫分析之后发展起来的一项最新免疫测定技术。
直接参与发光反应的标记物是
答案:A
1.化学发光酶免疫测定以过氧化物酶为标记酶,以鲁米诺为发光底物。
2.吖啶酯是化学发光免疫测定中较为理想的发光底物,在碱性环境中即可被过氧化氢氧化而发光。
3.电化学发光免疫测定中常用的发光底物为三联吡啶钌。
电化学发光免疫测定的底物是( )。
直接参与发光反应的标记物主要是具有在化学结构上能产生发光特殊基团的物质。这类物质在发光免疫分析过程中直接参与发光反应,不需要通过催化反应或能量传递来间接发光。根据公开发布的信息,以下是一些直接参与发光反应的标记物:
1. 吖啶酯类标记物
特点:吖啶酯类标记物在化学结构上有产生发光的特殊基团,它们通过起动发光试剂的作用而发光,能够在极短的时间内(如1秒内)完成强烈的直接发光,为快速的闪烁发光。
应用:吖啶酯作为标记物用于免疫分析,其化学反应简单、快速、无需催化剂。检测小分子抗原常采用竞争法,大分子抗原则采用夹心法,非特异性结合少,本底低。此外,与大分子的结合不会减小所产生的光量,从而增加了灵敏度。
2. 其他可能的直接发光标记物
虽然吖啶酯类标记物是最常见的直接参与发光反应的标记物之一,但也可能存在其他类型的直接发光标记物。然而,需要注意的是,并非所有发光标记物都直接参与发光反应,有些可能通过催化反应或能量传递来间接发光。
3. 间接参与发光反应的标记物
酶标记物:如辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(ALP),它们作为发光反应的催化剂或能量传递过程中的受体,通过催化底物发光或参与能量传递来间接发光。
非酶标记物:如三联吡啶钌等,它们可能作为化学反应的催化剂或能量传递过程中的中间体,但不直接参与发光反应,而是通过能量传递等方式影响发光强度。
综上所述,直接参与发光反应的标记物主要是具有在化学结构上能产生发光特殊基团的物质,如吖啶酯类标记物。在化学发光免疫分析中,选择合适的标记物对于提高检测的灵敏度和特异性至关重要
化学发光剂有哪些?
答案:C
吖啶酯常用于直接标记发光;HRP标记的化学发光免疫分析的发光底物为鲁米诺;碱性磷酸酶标记的化学发光免疫分析的发光底物为AMPPD;三联吡啶钌用于电化学发光免疫分析。
发光剂是指在发光反应中参与能量转移并最终以发射光子的形式释放能量的化合物,根据上述发光特点可将发光剂分为荧光素、生物发光剂和化学发光剂三种。常用的化学发光剂有以三种,酶促反应的发光底物的发光剂,直接化学发光剂,电化学发光剂。
声明:本站所有文章资源内容,如无特殊说明或标注,均为采集网络资源。如若本站内容侵犯了原著者的合法权益,可联系本站删除。