吖啶橙荧光染料进行细胞染色,可否鉴定其活-吖啶橙染色结果分析

光镜无法分辨线粒体(光镜下看不到),同时线粒体不含有天然荧光分子如叶绿素,所以荧光显微镜也无法看到,都是透明的。你看不到在哪里。

吖啶橙能使DNA和RNA都染色,显示不同的荧光。DNA呈绿色,RNA呈红色。因为线粒体中含有DNA,所以在荧光镜下呈绿色。但是颜色不深,因为线粒体中DNA含量不高。

吖啶橙的主要用途

AO/EB染色原理是AO能嵌入细胞核DNA发出绿色荧光,EB只能嵌入受损细胞核DNA发出橘红色荧光。

AO/EB染色是一种常用的细胞染色方法,用于评估细胞的生存状态和细胞膜完整性。AO(吖啶橙)和EB(溴乙锭)是两种荧光染料,在细胞中的行为有所不同。AO能够通过细胞膜进入细胞核,并与DNA结合,形成AO-DNA复合物,发出明亮的绿色荧光。这是因为AO能够穿过完整的细胞膜,并嵌入到细胞核DNA中。而EB只能通过受损的细胞膜进入细胞核,并与DNA结合,形成EB-DNA复合物,发出橘红色荧光。

游离叶绿体和细胞内叶绿体颜色和强度有无变化?

用作荧光指示剂,肿瘤细胞及细菌、核酸染色剂及移码突变的诱变剂。

吖啶橙是一种荧光色素,吖啶橙激发滤光片波长488nm。阻断滤光片波长515nm。吖啶橙与细胞中DNA和RNA结合量存在差别,可发出不同颜色的荧光(即着色特异性),这是由于DNA是个高度聚合物,吸收荧光物质的位置较少,发绿色荧光,而RNA聚合度低,能和荧光物质结合的位置多,故发红色荧光。

1. 普通光镜下,可看到叶绿体为绿色橄榄形,在高倍镜下可看到叶绿体内部含有较深的绿色小颗粒,即基粒。

2. 以Olympus荧光显微镜为例,在先用B(bule)激发滤片、B双色镜和O530(orange)阴断滤片的条件下,叶绿体发出火红色荧光。

3. 加入吖啶橙染色后,叶绿体可发出桔红色荧光,而其中混有的细胞核则发绿色荧光。

二、菠菜叶手切片观察

1. 在普通光镜下可以看到三种细胞 (1)表皮细胞: 为边缘呈锯齿形的鳞片状细胞; (2)保卫细胞: 为构成气孔的成对存在的肾形细胞;(3)叶肉细胞: 为排列成栅状的长形和椭圆形细胞。叶绿体呈绿色橄榄形,在高倍镜下还可以看到绿色的基粒。

2. 在荧光显微镜下,叶绿体发出火红色荧光,但其荧光强度要比游离叶绿体弱, 气孔发绿色荧光,两保卫细胞内的火红色叶绿体则环绕气孔排列成一圈。表皮细胞内的叶绿体数量要比叶肉细胞少。

3. 用吖啶橙染色后,叶绿体则发出桔红色荧光,细胞核可发出绿色荧光, 气孔仍为绿色。