吖啶酯结构式-吖啶酯是什么方法的标记物

2024-10-13 02:40:40

吖啶酯结构式-吖啶酯是什么方法的标记物

答案：E

考点：发光免疫分析的类型。[解析]根据发光反应的体系和标记物不同，可将发光免疫分析分为：①化学发光免疫分析，其标记物为吖啶酯类；②电化学发光免疫分析，采用三联吡啶钌发光；③化学发光酶免疫分析，其标记物为辣根过氧化物酶；④微粒子化学发光免疫分析，其标记物为碱性磷酸酶。

发光底物吖啶酯和鲁米诺相比较而言哪个更好？

化学发光免疫分析法以标记方法的不同而分为两种:

(1)化学发光标记免疫分析法;

(2)酶标记、以化学发光底物作信号试剂的化学发光酶免疫分析法从标记免疫分析角度, 化学发光酶免疫分析( chem ilum inescen t enzym e imm unoassay,

CL E IA ) , 应属酶免疫分析, 只是酶反应的底物是发光剂, 操作步骤与酶免分析完全相同[ 5 ]: 以酶标记生物活性物质(如酶标记的抗原或抗体) 进行免疫反应, 免疫反应复合物上的酶再作用于发光底物, 在信号试剂作用下发光, 用发光信号测定仪进行发光测定。目前常用的标记酶为辣根过氧化物酶(HRP) 和碱性磷酸酶(AL P) , 它们有各自的发光底物。常用的底物为鲁米诺(32氨基邻苯二甲酰肼,lum ino l) , 或其衍生物如异鲁米诺(42氨基邻苯二甲酰肼) , 是一类重要的发光试剂。鲁米诺的氧化反应在碱性缓冲液中进行, 在过氧化物酶及活性氧[ 过氧化阴离子(O 2- ) , 单线态氧(1O 2 ) , 羟自由基(OH·) , 过氧化氢(H2O 2) ]存在下,生成激发态中间体, 当其回到基态时发光, 其波长为425nm。

早期用鲁米诺直接标记抗原(或抗体) , 但标记后发光强度降低而使灵敏度受到影响。近来用过氧化物酶标记抗体, 进行免疫反应后利用鲁米诺作为发光底物, 在过氧化物酶和起动发光试剂(N aOH2H2O 2) 作用下, 鲁米诺发光, 发光强度依赖于酶免疫反应物中酶的浓度。Kodak Am erliteTM 半自动分析系统就是利用这一体系专门设计的。 (enhanced lum ines2cence enzym e imm unoassay, ELEIA )

在发光系统中加入增强发光剂, 如对2碘苯酚等, 以增强发光信号, 并在较长时间内保持稳定, 便于重复测量, 从而提高分析灵敏度和准确性。在全自动分析仪上, 还可通过计算机严密控制, 进行自动操作, 如加试剂, 混合, 温育, 洗涤, 加发光试剂, 发光计数, 数据处理, 绘制标准曲线, 直至完成病人血清样品的分析并打印出结果。Am erliteTM 发光增强酶免分析系统用荧光素、噻唑等增强剂, 其发光时间可持续长达20m in, 试剂盒有甲状腺功能检测的

促甲状腺素、三碘甲腺原氨酸、甲状腺素、甲状腺素结合球蛋白、游离甲状腺素, 与性激素有关的有促黄体激素、促卵泡激素、人绒毛膜促性腺激素、甲胎蛋白、雌二醇、睾酮, 以及其他方面的如癌胚抗原、铁蛋白、地高辛等。所用底物为环1, 22二氧乙烷衍生物, 这是一类很有前途的发光底物 , 用于化学发光酶免分析底物而设计的分子结构中包含起稳定作用的基团——金刚烷基, 其分子中发光基团为芳香基团和酶作用的基团, 在酶及起动发光试剂作用下引起化学发光。最常使用的底物是AM PPD [ 32(2’2 sp iroadam an2tane ) 42m ethoxy242( 3’2 pho spho ryloxy) 2phenyl21,22dioxetane ], 中文名为: 32(2’2 螺金刚烷) 242甲氧基242(3’2 磷酰氧基) 2苯基21, 22环二氧乙烷)。在碱性磷酸酶(AL P) 作用下, 磷酸酯基发生水解而脱去一个磷酸基, 得到一个中等稳定的中间体AM PD (半寿期为2～ 30m in) , 此中间体经分子内电子转移裂解为一分子的金刚烷酮和一分子处于激发态的间氧苯甲酸甲酯阴离子, 当其回到基态时产生470nm 的光, 可持续几十分钟(如图5)。AM PPD 为磷酸酯酶的直接化学发光底物, 可用来检测碱性磷酸酯酶或酶和抗体、核酸探针及其它配基的结合物。可检测到碱性磷酸酯酶的浓度为10- 15mo l?L 。

美国DPC 公司的Imm u lite 全自动酶放大发光免疫分析仪, 以碱性磷酸酶为标记物, 以金刚烷作发光底物, 测定灵敏度相当于10- 21mo l?mL 的酶, 采用聚苯乙烯珠作载体, 其检测水平已能达到10- 12g?mL。

化学发光酶免疫测定中常用来标记抗原或抗体的物质为（　　）。

吖啶酯和鲁米诺都是发光底物，但在某些方面存在差异。以下是它们之间的比较：

化学发光量子产率：吖啶酯的化学发光量子产率比鲁米诺高，这意味着使用相同量的发光剂时，吖啶酯产生的光子数更多，发光信号更强烈。

标记条件温和性：吖啶酯标记条件温和，对标记物没有明显负面影响。而鲁米诺在某些情况下可能会影响标记物的稳定性。

价格：吖啶酯的价格通常比鲁米诺高一些，这可能是因为它的制备成本相对较高。

使用范围：鲁米诺在某些检测体系中可能会产生较强的本底噪声，影响检测的灵敏度。而吖啶酯在这方面表现得更好，更适合用于一些灵敏度要求较高的检测体系。

综上所述，在某些情况下，吖啶酯可能比鲁米诺更适合作为发光底物。然而，这并不意味着鲁米诺不好。不同的发光底物适用于不同的检测体系，选择哪种发光底物需要根据具体的实验需求进行选择。武汉德晟生化建议根据不同的实验需要选购不同的发光剂。

发光免疫分析中直接参与发光反应的标记物主要有

答案：B

A项，吖啶酯类是目前常用的直接标记发光剂。BD两项，目前化学发光酶免疫测定中常用的标记酶有辣根过氧化物酶（HRP）和碱性磷酸酶（ALP）。辣根过氧化物酶催化的发光剂为鲁米诺及其衍生物；碱性磷酸酶催化的发光底物为AMPPD。C项，三联吡啶钌是电化学发光剂。E项，4-MUP（4-甲基伞酮磷酸盐）是碱性磷酸酶反应的荧光底物。化学发光酶免疫测定中常用来标记抗原或抗体的物质是鲁米诺。