关于吖啶酯化学发光反应的特点说法错误的是-吖啶酯作为发光剂的化学发光免疫测定中叙述错误的是
1、直接化学发光,标记物为吖啶酯(雅培)或者ABEI(新产业)
2、酶促化学发光,标记物为碱性磷酸酶(厦门波生)或者辣根过氧化物酶(强生)
3、电化学发光,标记物为三联吡啶钌(罗氏)
注:括号内为代表厂家。
简介:
化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA),是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合,用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。是继放免分析、酶免分析、荧光免疫分析和时间分辨荧光免疫分析之后发展起来的一项最新免疫测定技术。
直接化学发光常用的发光剂是
吖啶酯类的直接化学发光剂不需酶的催化作用,只需改变溶液的pH等条件就能发光。
吖啶酯的化学发光量子产率比鲁米诺高,而且吖啶酯标记条件温和,标记率高,标记后不影响分离。
吖啶酯和鲁米诺两者价格也相差很大。武汉德晟生化建议您根据不同实验需要选购不同发光剂
吖啶酯化学发光法,四周能判定.排除率有多少
吖啶酯和三联吡啶钌。
吖啶酯是一类可用作化学发光标记物的化学物质,加入发光启动试剂后0.4s左右发射光强度达到最大,半衰期为0.9s左右。
三联吡啶钌其标记物的发光原理是,一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应。
化学发光剂的常用发光剂
你好 吖啶酯化学发光法检测艾滋病属于第四代检测方法,发光法和酶联一样准确的
从理论上来讲四代试剂的窗口期会比三代缩短7-12天左右。一般发生高危险后3个月复查 如果仍是阴性的话 基本可以排除感染了
根据发光反应的体系和标记物不同,可将发光免疫分析分为
酶促反应的发光底物
酶促反应的发光底物是指经酶的降解作用而发出光的一类发光底物,目前化学发光酶免疫技术中常用的酶有辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AP)。HRP的发光底物为鲁米诺或其衍生物和对-羟基苯乙酸。AP的发光底物为3-(2-螺旋金刚烷-4-甲氧基-4-甲基-4-(3-磷酸氧基)-苯基-1,2-二氧乙烷(AMPPD)和4-甲基伞形酮磷酸盐(4-MUP,荧光底物)。
(1).鲁米诺或其衍生物。 鲁米诺的氧化反应在碱性缓冲液中进行,通常以0.1mol/L pH8.6Tris缓冲液作底物液。要注意是:首先,鲁米诺和H2O2在无HRP催化时也能缓慢自发发光,而在最后光强度测定中造成空白干扰,因而宜分别配制成2瓶试剂溶液,只在用前即刻混合;其次, HRP发光增强剂如某些酚试剂(如邻-碘酚)或萤火虫荧光素酶可增强HRP催化鲁米诺氧化的反应和延长发光时间,提高发光敏感度。
(2).对-羟基苯乙酸(HPA)。 对-羟基苯乙酸(HPA)在H2O2存在下被HRP氧化或氧化二聚体(荧光物质),在350nm激发光作用下,发出450nm波长的荧光,可用荧光光度计测量。
(3).AMPPD。 AMPPD在碱性条件下,被ALP酶解生成相当稳定的AMP-D阴离子,其有2-30min的分解半衰期,发出波长为470nm的持续性光,在15min时其强度达到高峰,15-60min内光强度保持相对稳定。
(4)4-MUP。 4-MUP被ALP催化生成4-甲基伞形酮,在360nm的激发光的作用下,发出448nm的荧光,用荧光光度计进行测量。
直接化学发光剂
直接化学发光剂不需酶的催化作用,只需改变溶液的pH等条件就能发光的物质,如吖啶酯(acridinium, AE)在有过氧化氢的稀碱溶液中即能发光。
电化学发光剂
电化学发光剂是指通过在电极表面进行电化学反应而发出光的物质。化学发光剂三联吡啶钌[Ru(bpy)3]2+(图16-7)和电子供体三丙胺(TPA)在阳性电极表面可同时失去一个电子而发生氧化反应。二价的[Ru(bpy)3]2+被氧化成三价,成为强氧化剂,TPA失去电子后被氧化成阳离子自由基TPA+,它很不稳定,可自发地失去一个质子(H+),形成自由基TPA.,成为一种很强的还原剂,可将一个高能量的电子递给三价的[Ru(bpy)3]3+使其形成激发态的[Ru(bpy)3]2+.。激发态的三联吡啶钌不稳定,很快发射出一个波长为620nm的光子,回复到基态的三联吡啶钌。这一过程可在电极表面周而复始地进行,产生许多光子,使光信号增强。
答案:E
考点:发光免疫分析的类型。[解析]根据发光反应的体系和标记物不同,可将发光免疫分析分为:①化学发光免疫分析,其标记物为吖啶酯类;②电化学发光免疫分析,采用三联吡啶钌发光;③化学发光酶免疫分析,其标记物为辣根过氧化物酶;④微粒子化学发光免疫分析,其标记物为碱性磷酸酶。
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