吖啶橙染色结果解读-吖啶橙用什么稀释

用作荧光指示剂，肿瘤细胞及细菌、核酸染色剂及移码突变的诱变剂。

吖啶橙是一种荧光色素，吖啶橙激发滤光片波长488nm。阻断滤光片波长515nm。吖啶橙与细胞中DNA和RNA结合量存在差别，可发出不同颜色的荧光（即着色特异性），这是由于DNA是个高度聚合物，吸收荧光物质的位置较少，发绿色荧光，而RNA聚合度低，能和荧光物质结合的位置多，故发红色荧光。

ao/eb染色原理

1. 普通光镜下，可看到叶绿体为绿色橄榄形，在高倍镜下可看到叶绿体内部含有较深的绿色小颗粒，即基粒。

2. 以Olympus荧光显微镜为例，在先用B(bule)激发滤片、B双色镜和O530(orange)阴断滤片的条件下，叶绿体发出火红色荧光。

3. 加入吖啶橙染色后，叶绿体可发出桔红色荧光，而其中混有的细胞核则发绿色荧光。

二、菠菜叶手切片观察

1. 在普通光镜下可以看到三种细胞 (1)表皮细胞: 为边缘呈锯齿形的鳞片状细胞; (2)保卫细胞: 为构成气孔的成对存在的肾形细胞；(3)叶肉细胞: 为排列成栅状的长形和椭圆形细胞。叶绿体呈绿色橄榄形，在高倍镜下还可以看到绿色的基粒。

2. 在荧光显微镜下，叶绿体发出火红色荧光，但其荧光强度要比游离叶绿体弱, 气孔发绿色荧光，两保卫细胞内的火红色叶绿体则环绕气孔排列成一圈。表皮细胞内的叶绿体数量要比叶肉细胞少。

3. 用吖啶橙染色后，叶绿体则发出桔红色荧光，细胞核可发出绿色荧光, 气孔仍为绿色。

关于线粒体在不同显微镜中的颜色

AO/EB染色原理是AO能嵌入细胞核DNA发出绿色荧光，EB只能嵌入受损细胞核DNA发出橘红色荧光。

AO/EB染色是一种常用的细胞染色方法，用于评估细胞的生存状态和细胞膜完整性。AO（吖啶橙）和EB（溴乙锭）是两种荧光染料，在细胞中的行为有所不同。AO能够通过细胞膜进入细胞核，并与DNA结合，形成AO-DNA复合物，发出明亮的绿色荧光。这是因为AO能够穿过完整的细胞膜，并嵌入到细胞核DNA中。而EB只能通过受损的细胞膜进入细胞核，并与DNA结合，形成EB-DNA复合物，发出橘红色荧光。

光镜无法分辨线粒体（光镜下看不到），同时线粒体不含有天然荧光分子如叶绿素，所以荧光显微镜也无法看到，都是透明的。你看不到在哪里。

吖啶橙能使DNA和RNA都染色，显示不同的荧光。DNA呈绿色，RNA呈红色。因为线粒体中含有DNA，所以在荧光镜下呈绿色。但是颜色不深，因为线粒体中DNA含量不高。