吖啶结构-吖啶标记常见问题

答案：A

考点：发光免疫分析中的标记物质及类型。[解析]发光免疫分析中的标记物根据其参与的化学反应不同可分为三类：①直接参与发光反应的标记物，如吖啶酯类标记物；②以催化作用或能量传递参与发光反应的酶标记物，如碱性磷酸酶标记物；③以能量传递参与氧化反应的非酶标记物，如三联吡啶钌标记物。

化学发光免疫分析仪的发光试剂

答案：A

1.化学发光酶免疫测定以过氧化物酶为标记酶，以鲁米诺为发光底物。

2.吖啶酯是化学发光免疫测定中较为理想的发光底物，在碱性环境中即可被过氧化氢氧化而发光。

3.电化学发光免疫测定中常用的发光底物为三联吡啶钌。

HRP 标记的CLEIA常用的底物为鲁米诺(32氨基邻苯二甲酰肼,lum ino l) ,或其衍生物如异鲁米诺(42氨基邻苯二甲酰肼) , 是一类重要的发光试剂。其结构如图4 所示。鲁米诺的氧化反应在碱性缓冲液中进行,在过氧化物酶及活性氧[ 过氧化阴离子(O 2- ) , 单线态氧(1O 2 ) , 羟自由基(OH·) , 过氧化氢(H2O 2)]存在下,生成激发态中间体, 当其回到基态时发光, 其波长为425nm。

早期用鲁米诺直接标记抗原(或抗体) ,但标记后发光强度降低而使灵敏度受到影响。近来用过氧化物酶标记抗体, 进行免疫反应后利用鲁米诺作为发光底物, 在过氧化物酶和起动发光试剂(NaOH2H2O 2) 作用下, 鲁米诺发光, 发光强度依赖于酶免疫反应物中酶的浓度。Kodak Am erliteTM半自动分析系统就是利用这一体系专门设计的。