吖啶黄用什么稀释静脉注射-盐酸吖啶黄用什么稀释输液
缺钙,要喂钙片
鱼的常见病与防治
鱼病防治常见病症和处理
热带鱼疾病通常分为两大类:一类为生物性疾病。由细菌、病毒、真菌等引起的传染病,其特点大多是发病急,传播快,发病率和亡率较高,不易防治;由寄生虫引起的寄生虫病,鞭特点是发病和传播慢,发病率和亡率较低,防治较容易。另一类是非生物性疾病。其致病原因是水质理化性质的改变引起饲水变质,诱发鱼体生理机能失调,使鱼体出现不适,出现代谢紊乱而发病。
1、白点病
病原体为小瓜虫,热带鱼在一年四季都可感染,发病率和亡率很高。
症状和病变
患病初期,胸鳍、背鳍、尾鳍和体表皮肤均有白点状散布,病鱼虽照常觅食,但常聚集在鱼缸的角上互相挤擦。几天后白点布满全身,病鱼常呆滞状浮在水面,严重的全身似洒满白粉,多在春、秋和梅雨季节发生,尤其在缺乏光照、低温、活饵的尾部下容易流行。此病传染速度很快,如不及时治疗会二次感染合并水霉病及细菌感染,严重时,药物无效,会大批亡。要及早治疗。
治疗方法
A、提高水温至28摄氏度,数天后小瓜虫破裂脱落。这时更换新水,保持水温,病鱼基本上会痊愈。
B、选用0.05%~0.07%浓度的红汞溶液,水鱼病鱼5~15分钟,持续2~3天,效果良好。
C、“尿砖”,将新砖在尿液中浸泡24小时,晾干后放入病鱼的水族相中,数日后就能见效。
2、水霉病
又叫白毛病,病原体主要是水霉菌和霉菌,寄生在鱼体的伤口和鱼卵上,是较常见的鱼病。病因主要是鱼体受伤,鳞片脱落等,导致病菌侵入伤口,病因:在捕捞、运输时鱼体受到外伤或寄生虫使鱼的皮肤受伤后被霉菌孢子侵入从而感染。
病原体:水霉属、绵霉属等水生霉菌。
症状和病变
鱼刚染上病时看不出什么症状。一旦发现鱼体长“白毛”时,菌丝已侵入鱼体伤口,蔓延到肌肉组织间隙之中。随着病情发展,患处肌肉腐烂,食欲减退,最终亡。这种疾病在一年四季内都可发生。为了防止水霉病的发生,除应注意*作时尽量防止损伤鱼体和被寄生虫咬伤之外,还可以在水中放入少量食盐,以抑制水霉病的发生。鱼体长出“白毛”,呈灰白色,菌丝与伤口的细胞组织缠绕粘附,使组织坏。同时病鱼食欲减退,最后亡。
治疗方法
A、用食盐250克加小苏打250克混合液泼洒于100厘米x55厘米x45厘米的鱼缸,坚持数次,效果显著。
B、在100千克水中溶解孔雀石绿0.3克或次甲基蓝,浸洗鱼体10~20分钟,数日后可见菌丝脱落。1、2%-3%的盐水浸洗,每天一次,每次5-10分钟。
C、特效药百万分之一至二(1-2ppm)的孔雀石绿溶液每天浸洗20-30分钟。
D、百万分之二(2ppm)的高锰酸钾加上1%的盐水混合后将病鱼浸泡20-30分钟。
E、提高水温以抑制水霉的生长。并且可用一盏15瓦的紫外线灯每日照射数小时可有效的抑制和消灭水霉菌。
3.腮霉病
病原体:腮霉属的真菌
症状:菌体的孢子散落水中时,碰上鱼的腮部,便附着其上侵入组织生长。当发现鱼表现为呼吸困难时。打开其腮部会发现菌丝。
治疗方法:还是预防保持水质的清洁。抑制菌体的生长就可以避免此病的发生。
治疗可以参照水霉病的治疗这里不再罗嗦了。
4、烂鳃病
热带鱼鳃部疾病有寄生虫性烂鳃和细菌性烂鳃。亡率较高。
症状和病变
1)指环虫寄生:病鱼鳃部明显红肿,鳃盖张开,鳃失血。严重时停止进食,最终因呼吸受阻而。
2)车轮虫寄生:鳃部失血,严重时局部溃烂,呈灰**,鳃骨外露。停止进食,最终因呼吸受阻而。
3)细菌性烂鳃:病鱼鳃部溃烂,附有较多的白色粘液。严重时鳃丝被腐蚀成一个个圆形小洞,软骨外露,最后窒息而。鱼腮充满粘液,腮丝及腮盖骨内表皮均有出血现象。腮丝会很快由红变白,逐渐腐烂最后整个腮部全部腐烂鱼儿也因此失去呼吸功能而亡。
治疗方法
A、对指环虫寄生虫类:
用晶体敌百虫0.1~0.2克溶于10千克水中,浸泡病鱼5~10分钟。
B、对车轮虫寄生虫类:
用硫酸铜0.2克和硫酸亚铁0.1克溶于10千克的水中,浸洗病鱼5~10分钟,多次用药后可全愈。
C、对细菌性烂鳃:
a在10千克的水中溶解11.5%浓度的氯胺丁0.02克,浸洗15~20分钟,多次用药后见效。
b在容水量为100千克的水族箱中放入痢特灵或土霉素2~3片,较长时间浸洗鱼体。
c用低浓度的高锰酸钾溶液浸洗或泼洒在水族箱中,也有一定效果。
5、烂嘴病
又称棉口病或白嘴病。红剑、黑玛俐等易患此病。
症状:吻部长着一种棉花样的菌丝,传染力很强,亡率高。在水质恶化的水族箱里最容易患此病。患病时不仅嘴部,连鳃盖都可见到棉花状的菌丝。发病3-4天,整箱鱼全部亡。由于传染力强,最好将水族箱、用具等彻底消毒。
治疗方法
在缸中,每4公斤(4千克)水加入5一10万单位水溶性青霉素。亦可用金霉素治疗。需将水族箱进行消毒处理。可用15%的甲醛溶液浸洗盛过病鱼的缸和捞过病鱼的鱼网。
6、烂鳍病、烂尾病:因细菌、霉菌自伤口所引起的疾病。
多由饲水不良,水质长期浑浊,受新水刺激过多,或鱼儿互相撕咬导致细菌感染。
症状:鱼鳍变白,伤口分泌粘液,尾鳍与背鳍、腹鳍均有可能腐烂,并有血斑点产生。当病情恶化时,腐烂的鳍和尾会脱离鱼体,严重时导致亡。
治疗方法
A,在100千克的水中放呋喃西林粉0.2克进行浸洗消毒,多次用药后可缓解病情。
B,在100千克水中放痢特灵3~5片,浸洗病鱼30分钟。
C,在100千克水中放土霉素5~8片浸洗消毒,可预防感染此病。
D,用低浓度的高锰酸钾加食盐溶液浸洗消毒。
E,用庆大霉素浸洗,在100厘米X50厘米X35厘米的水族箱中放2支。
F,用1%食盐水浸泡病鱼,直至痊愈。
7、肠炎
病原体为点状产气单孢杆菌,吃了不洁净的食物或是吃的过饱、肠道饱胀、排泄受阻,导致细菌感染肠道引发肠炎。
症状
须细心观察,病鱼呆滞,停在鱼缸角不动,体肌作短时间的抽搐,肛门红肿重血,严重时溃疡直至亡。
治疗方法
A,在80厘米X50厘米X40厘米的水族箱中,用0.2克呋喃西林粉或2片呋喃溶解在水中进行浸洗,用药2~3次,效果很好。
B,在80厘米X50厘米X40厘米的水族箱中放庆大霉素2支,有一定效果。
C,在80厘米X50厘米X40厘米的水族箱中放红霉素2片(或土霉素3~5片),有一定疗效。内服主要是鱼服康、磺胺胍、纳克菌等药浴的话就要用到呋喃西林、庆大霉素、土霉素、痢特灵等。内服药必须溶解后混合到牛新汉堡或者是其它的混合饵料当中投喂。如果鱼儿已经无法吃食的话,就只有药浴了。也有肌肉注射庆大霉素和青霉素的,不过我想我们还是算了吧。
8、竖鳞病
有叫松鳞病,病原体为点装极毛杆菌。多为频繁换水所致,由于水不清洁,鱼体被划掉鳞片及水中公含少量氧气,饲养水温过高等情况下,常会引起此病,较难痊愈。鱼的鳞由平覆鱼体表变成象松球一样一片一片的象外长开。鳞片的基部鳞囊水肿。在鳞片上轻轻一按,鳞片就会脱落。2-3天后病鱼就会亡。此病好像不具传染性,多见于金鱼、锦鲤、攀鲈科鱼及卵胎生鳉科鱼类,象玛莉、月鱼、孔雀等。每年春季较为流行,发病的鱼看起来很恐怖,我到现在想起来头皮就会发麻。而且也不好治疗即便是治愈了观赏价值也大打折扣。所以不如人道毁灭来的好一些。
症状
病鱼体表肿胀,部分鳞片向外张开似松球,鳞片基部有水肿。此外,病鱼还有烂鳍、鳍条基部出血等现象。严重时,殶鱼常亡。
治疗方法
A、用1%盐水与1%的小苏打液混合,浸洗鱼体10分钟,多次用药方可见效。
B、用呋喃西林粉0.1 克加庆大霉素2支,并溶解在80厘米X50厘米X40厘米的水族箱中,长时间药浴有一定疗效,尤其是患病初期。
C、每40千克水加入0.5克氯霉素浸浴。
D、五万分之一的四环素溶液药浴1小时/天。
E、2%的食盐加3%的碳酸氢钠溶液药浴10分钟/天。
F、呋喃西林加痢特灵溶液浸泡。
9、皮肤充血病
本病主要是由于光照不足,水质不良或过多新水刺激而因起。
症状
病鱼体表皮肤出现大小不等的暗红色斑块,布满两侧,食欲明显减退,轻着影响观赏,重者导致亡。
治疗方法
A,将呋喃西林粉0.2克加食盐250克溶于10千克水中,浸洗病鱼10~20分钟。
B,延长水族箱的光照时间。
C,用低浓度的高锰酸钾溶液浸洗病鱼10小时。
D,用食盐水泼洒,一般100厘米X50厘米X35厘米的水族箱中放盐50~100克。
10、外伤病:直接在外伤处涂红药水(不要涂在眼部),每天2次。
11、鱼虱病:一种寄生虫病 捞取鱼后,以黑布(须用水浸湿)蒙住鱼的眼睛,迅速拔除鱼虱;鱼虱多时用驱虫药。
12、胡椒病:胡椒病是因卵圆鞭毛虫寄生、感染的。主要是因水族箱里的水太陈旧。
症状:病鱼身体和鱼鳍上面坐出现细小的**粉状物,好像撒了胡椒粉一样。鱼呼吸加快,常把所有的鱼鳍紧贴在身上,并在水中乱窜,此病的病因是水族箱的水长久不换,水温常高达25度以上。病鱼如不及时处理,4-5天内就会亡。
治疗方法:将鱼放入1%的食盐水中,大约2-3天可治愈。经常换水,保持水的清洁,可预防此病。
13、蒙眼病(眼霉病)
症状:患病的鱼,眼部会出现一层白色的不透明物,若置之不理的话,数天之内鱼眼就会失明。当霉菌侵入脑训时鱼会亡。
治疗方法:
A,用1%的食盐水浸泡鱼体。
B,市售的治疗药品有爱斯拉奇眼病特效药,皇牌特效药。
14、鳃病
症状:寄生虫侵入鱼,初期会在水中狂乱地冲撞,且因寄生虫侵入鱼鳃,鱼会感到呼吸困难,因而鳃盖的闭合也会因此增大。恶化时,鱼会迟钝在沉在水底,最后也必然亡。
治疗方法:
A,用2毫克/升福尔马林放入水中浸泡,几小时后换水,治疗较有效。
B,用市售的治疗药品,有克肤虫灵和驱虫药。
15、指环虫病
症状:指环虫寄生于鱼鳃。随着虫体增多,鳃丝受到破坏。后期,鱼鳃明显肿胀,鳃盖难以闭合,病鱼不安,呼吸困难,晚期游动缓慢,食欲不振,消瘦。
治疗方法:
A,用3毫克/升高锰酸钾浸泡,十多分钟后换水。
B,用1-2毫克/升敌百虫浸泡,十几分钟后换水。
C,市售的驱虫药治疗。
16、感冒(热带鱼易患此病,必须注意预防。
症状:鱼静止不动,严重时浮于水面,皮肤和鳍失去原有光泽,颜色暗淡。
病因:水温骤变,鱼突然遭到不通承受的水温温差而发病。
治疗方法:
A,将水温恒定,用小苏打或者1%的食盐溶液浸泡病鱼,增加光照,以求其渐渐恢复健康。
17、碱
症状:鱼鳍出现松软无力。
病因:水质呈现极端的碱性,鱼可能会发生此病。
治疗方法:A经常换水,保持水质洁净。
18、五爪虫病
症状:鱼体粘附上五爪虫,会发炎,渐而消瘦亡。
病原:病原为五爪虫。该虫生命力强,毓力特强,可由胴体各部萌芽繁殖,粘附在玻璃面上,一星期可遍布整个水族箱,此时便难以清除。
治疗方法:
A,把鱼移出,将整个水族箱消毒。用刀片刮除玻璃上的萌芽体。可用高锰酸钾杀灭五爪虫。如果有珍珠马甲鱼,它会食除五爪虫。预防的方法也是要注意活饵的消毒。也可以在水族箱放养珍珠马甲或接吻鱼捕食五爪虫。
少数的虫可以用镊子拔除。大量时就要移出鱼和水草,并用用高锰酸钾对水族箱全面消毒。用刀片铲除玻璃壁上的虫体,再以百万分之一的高锰酸钾杀灭。
不可用敌百虫消灭五爪虫。
19、吸虫病
症状:以惊人的速度在水中游来游去。
将鱼放入福尔马林水溶液中,每4千克水中放入福尔马林1毫升。浸泡20秒后立即捞回水族箱中,每天1,连续2-3天可治愈。
20、白皮病
有成白尾病。
病因:水族箱内不洁净尤其是鱼的粪便没及时清理掉,或是捕捞和运输的时候*作不慎使鱼受伤导致病源菌感染(可见外伤的危害)。
病原体:称为白皮极毛杆菌的格兰氏阴性杆菌
症状:背鳍或尾鳍也可能是背鳍加尾鳍^_^的基部(也就是鱼背部和尾柄)出现小白点。白点迅速扩大只至尾鳍全部发白、烂掉,病鱼的游动能力明显降低。平衡失控会竖起来上下垂直游动。2-3天亡。亡率极高。5-8月流行此病。
治疗方法:百万分之二十五的(25ppm)的土霉素或金霉素溶液药浴30分钟/天。水族箱用百万分之一的漂白粉溶液消毒。
21、出血性腐败症
病因:鱼体受伤病源菌侵入造成。冬天如果鱼冻伤的话也是以大病因。
病原体:一种叫做荧光极毛杆菌的革兰氏阴性菌
症状:体表出血、发炎、鳞片脱落、背鳍或全部的鳍充血、鳍会烂的象一柄破扇子。掉鳞处或烂鳍处会发水霉。会和烂腮、出血症(见病毒性疾病)并发。
治疗方法:1%的食盐水或是百万分之二(2ppm)的高锰酸钾或是百万分之二(2ppm)的漂白粉溶液浸泡。
22、打印病
又称腐皮病
病因:水质不洁或鱼体受伤的时候会发此病。无明显的季节分别。
病原体:点状产气单细胞菌的点状亚种也属革兰氏阴性菌的一种。
症状:在肛门附近或是尾柄上(极少见于鱼体的前部)皮肤和肌肉发炎象脓包一样。肌肉会逐渐烂掉形成圆形或者是椭圆形的病灶。好像打了一个烙印一样。
治疗方法:参照其它的革兰氏阴性菌的治疗方法即可。
23、疖疮病
病原体:一种点状产气单包杆菌。也属于革兰氏阴性菌的一种。
症状:皮下肌肉组织发炎,有类似溃疡的脓疮、浮肿。脓疮里有大量的脓、血和细菌。鱼鳍基部充血。鳍条开裂。严重时肠子里亦充血。
治疗方法:参照其它的革兰氏阴性菌的治疗方法即可。
24、白头白嘴病
病原体:粘球菌的一种。类似于烂腮病的病原体。最适宜温度为25摄氏度。PH值在6-8.5之间。
症状:病鱼的额部和嘴的周围细胞坏,变白。发生溃疡。有时会带有灰白色的绒毛状物。体瘦发黑。发病极快、传染迅速。一日之间会全部亡。多见于5月下旬至7月上旬。
治疗方法:将百万分之一(1ppm)的漂白粉撒入水族箱里消毒。
25、鱼虱病
病原体:水生寄生甲壳类鱼虱。
症状:鱼虱附着于鱼体表面,吸食鱼的血液。伤口常造成其他细菌类或真菌类的感染。五六个鱼虱会在十来分钟咬一尾15cm长的健康鲫鱼。危害不可谓不大。
治疗方法:同于猫头虱病的治疗。
26、机械性损伤:鱼的机械损伤倒和汽车、飞机有那么一点点点点的关系。也就是由于捕捞、运输以及其它的各种原因给鱼只造成的体表损伤。往白了说就是外伤了啦。
鱼怎么会受伤的呢?a、你捞鱼的时候,如果你的捞网是用粗的棕绳做成的话。你的鱼会不受伤?
b、当你拎着装着你挑好的鱼的塑料袋回家的时候,一不留神。你的塑料袋掉到地上摔了个水花四溅。你的爱鱼掉到地上还噗啦噗啦地跳上几下。它能不受伤?
c、你的爱鱼属于好战分子那一类。一见面非要你我活不成,你说它能够不受伤吗?还有很多原因会造成你的爱鱼受伤的啦。
受伤的鱼轻的就是鳞片脱落和鳍肢破损。稍严重一点的出现皮肤损伤,出血。如果到了伤可见骨的情况的话。那就比较可怕了。较轻的外伤并不可怕,到是伤口万一感染上真菌或者是细菌、病毒造成二度损伤的话就麻烦了。那么我们该怎么办呢?办法就是:一不要买受伤的鱼,二不要让鱼受伤。包括运输途中、放养过程中、以及混养时的选择还有就是捞鱼的时候,一定要注意选择合适的工具和轻柔的手法。 如果万一鱼儿受了伤的话,我们可以在鱼的伤口上涂抹稍加稀释的红药水,但要注意一定不要涂到眼睛上。也可以将伤鱼浸泡在百万分之一的抗生素溶液中,抗生素可选择青霉素、土霉素、呋喃西啉等。但最好不要将没受伤的鱼一起浸泡。以免给它们造成不好的影响。
27、出血热
病原体:疱疹病毒
症状:病鱼体表发黑无光泽,口、鳍条、肌肉充血。有时腮盖、头、腹壁充血。腮丝呈鲜红的点状或块状充血。严重的腮会失血而苍白成为“白腮”。眼球会有突出症状(这种突出症状和龙鱼的眼球突出症不同)。发病季节多在6-9月间,水温26-30摄氏度时最为流行。
治疗方法:a、充分照射阳光,并设法降低水温至25摄氏度以下。
b、用中药大黄的浸取液水浴。
c、用大黄和枫香树叶0.25-0.5克砚成粉末煎煮后混合牛心汉堡投喂同时在水族箱中连续两天投放百万分之0.6(0.6ppm)的敌菌灵溶液。
d、抗生素(比如青霉素、红霉素等)浸泡。
28、痘疮病
病原体:痘疮病毒的病毒粒子
症状:初期病鱼体表出现白色小斑点,并且覆盖一层白色粘液。之后白点会越来越多,病患区域逐渐扩大。表皮增厚形成石蜡状的的增生物。病鱼的体形消瘦至亡。一般在春季,水温在15摄氏度时发病。
治疗方法:可用氯霉素治疗。小鱼用百万分之0.225(0.225ppm)的药液浸洗成鱼可以注射。
29、疾病预防(Prevent a disease)
1.加强饲养管理
鱼体抗病力的强弱与日常饲养管理工作密切相关。要使鱼本质健壮,必须加强日常的饲养管理工作。
1)喂食要精心,做到投饵定时、定质、定量。喂食时间,一般在上午9~10时和下午3~4时,投喂鱼虫前要将鱼虫漂洗干净,或用低浓度的高锰酸钾溶液消毒,防止腐败物和各种病原体带入水族箱内。
2)加强水质保养:水质酸度过高,通常选用小苏打溶解进行调节;若水质碱度过高,可用草酸或磷酸二氢钠溶剂进行调节。
2.注重日常观察员
1)鱼体检查:鱼体检查的目的是找出病原体和查清各种病症的根源,为进行综合分析,为确定疾病原体提供依据。
2)体表检查:被检查的鱼必须是新鲜的,最好是刚从水族箱中挥出的病鱼或刚亡的病鱼。 3)鳃部检查:检查鳃时,按顺序先查看鳃盖是否张开,有无充血、发炎、腐烂等症状,然后用手指翻开鳃盖,观察鳃色是否正常,粘液是否增多,鳃未端是否肿大和腐烂。
4)内脏器官检查:主要检查肠道是否有病变,如细菌性肠炎,肠粘膜表现为出血或充血,肛门红肿。
3.药物预防
在发病季节到来时,如果气温维持在12~22摄氏度,且天气出现连日阴雨时,就应及时采取药物预防措施,可在换水时将鱼群集中在面盆中,用高浓度的药水进行短时间集体消毒,再换入新水中。也可用低浓度的药水进行全缸(池)泼洒
焦虫病怎么治
已知的有烷化剂、碱基类似物(base analog)、羟胺(hydroxylamine)、吖啶色素等. 常用化学诱变剂的种类及作用机制 (一)烷化剂 是栽培作物诱发突变的最重要的一类诱变剂.药剂带有一个或多个活泼的烷基.通过烷基置换,取代其它分子的氢原子称为"烷化作用"所以这类物质称烷化剂. 烷化剂分为以下几类: 1. 烷基磺酸盐和烷基硫酸盐 代表药剂:甲基磺酸乙酯(EMS)、硫酸二乙酯(DES) 2. 亚硝基烷基化合物 代表药剂:亚硝基乙基脲(NEH)、N-亚硝基-N-乙基脲烷(NEU) 3. 次乙胺和环氧乙烷类 代表药剂:乙烯亚胺(EI) 4. 芥子气类 氮芥类、硫芥类 烷化剂的作用机制--烷化作用 作用重点是核酸,导致DNA断裂、缺失或修补. (二)核酸碱基类似物 这类化合物具有与DNA碱基类似的结构. 代表药剂: 5-溴尿嘧啶(BU)、5-溴去氧尿核苷(BudR) 为胸腺嘧啶(T)的类似物 2-氨基嘌呤(AP) 为腺嘌呤(A)的类似物 马来酰肼(MH) 为尿嘧啶(U)的异构体 作用机制:作为DNA的成份而渗入到DNA分子中去,使DNA复制时发生配对错误,从而引起有机体变异. (三)其它诱变剂 亚硝酸 能使嘌呤或嘧啶脱氨,改变核酸结构和性质,造成DNA复制紊乱.HNO2还能造成DNA双链间的交联而引起遗传效应. 叠氮化钠(NaN3) 是一种呼吸抑制剂,能引起基因突变,可获得较高的突变频率,而且无残毒. 以下是具体的使用方法,希望对你有点作用! 化学诱变剂的剂量主要决定于其浓度和处理时间. 化学诱变剂都具毒性,其中90%以上是致癌物质或极毒药品,使用时要格外小心,不能宜接用口吸,避免与皮肤直接接触,不仅要注意自身安全,也要防上污染环境,造成公害. 一、碱基类似物用于诱发突变的碱基类似物有5-BU、5-FU、BUdr、5-IU等他们是胸腺嘧啶的结构类似物,AP、6-MP是腺嘌呤的给、结构类似物.最常用是5-BU和AP. 当将这类物质加人到培养基中,在繁殖过程中可以掺人到细菌DNA分子中,不影响DNA的复制.它们的诱变作用是取代核酸分子中碱基的位置,再通过DNA的复制,引起突变,困此,也叫掺人诱变剂.显然这一类诱变剂要求微生物细胞必顿处在代谢的旺盛期,才能获得最佳的诱变效果. (一)碱基类似物的诱变机制正常的碱基存在着同分异构体,互变异构现象在嘧啶分子中以酮式和烯醇式的形式出现,而嘌呤分子中以氨基和亚氨基互为变构的形式出现、一般互变异构现象在碱基类似物中比正常DNA碱基中频率更高. 5-BU 导致A:T碱基对转换为GC碱基 2-氨基嘌呤也可以诱发DNA分子中A:T- G:C或G:C- A:T的转换. (二)碱基类似物的诱变处理方法(以5-BU为例) 1.单独处理将微生物液体培养到对数期.离心除去培养液,加入生理盐水或缓冲液.饥饿培养8-10h,消耗其体内的贮存物质、将5-BU加入到经饥饿培养的培养液中,处理浓度为25-40ug/ml,温合均匀.取0.1-0.2ml菌悬液加人到琼脂培养基上涂布培养.在适宜温度下,使之在生长过程中诱变处理.培养后挑取单菌落,进行筛选.如果是处理真菌、放线菌孢子,则要提高5-BU的浓度,常处理浓度为 0.1mg/ml. 2.与辐射线复合处理据报道;如果菌体先用5-BU等碱基类似物进行处理,使它们首先渗人到DNA分予中,然后用辐射线照射,诱变效果会比单独使用射线要好.因此碱基类似物也是一种辐射诱变的增敏剂.从而提高突变率. 二、烷化剂(一)烷化剂的作用机制烷化剂分单功能烷化剂和双功能或多功能烷化剂两大类.前者仅一个烷化基团,对生物毒性小,诱变效应大.后者具有两个或多个烷化基团,毒性大,致率高,诱变效应较差.主要原因是双功能烷化剂有硫芥、氮芥. 烷化剂主要是通过烷化基团使DNA分子上的碱基及磷酸部分烷化,DNA复制时导致碱基配对错误而引起突变,碱基中容易发生烷化作用的是嘌呤类.其中鸟嘌呤N7是最易起反应的位点,几乎可以和所有烷化剂起烷化作用;此外,DNA分子中比较多的烷化位点是鸟嘌呤O6和胸腺嘧啶O4,这些可能都是引起突变的主要位点.其次引起烷化的位点是鸟嘌呤N3、腺嘌呤N2,腺嘌呤N7和胞嘧啶N3.这些位点引起碱基置换的仅占烷化作用的10%左右.因此,由这些位点改变所引起的突变仅是少数. 烷化剂也能造成磷酸和核糖之间的共价键断裂,而造成突变. (二)烷化剂的性质溶液烷化剂的性质比较活泼,不太稳定,在水溶液中容易发生分解.它们大部分半衰期很短,其长短与温反、溶液PH关系很大.因此,化学诱变剂要现用现配还要避光.配制烷化剂时,要采用合适的出缓冲液. 有毒! (三)常用的烷化剂亚硝基胍(NTG) **晶体物质,性质不稳定,容易光解,**变为绿色时,诱变效应际低. 有超诱变剂之称,常用缓冲溶液有磷酸缓冲液和Tri缓冲液. 诱变处理方法: ①用一定值的磷酸缓冲液或Tri缓冲液洗制成菌悬液.②NTG母液:配制需加助溶剂甲酰胺或丙酮少许,然后加缓冲液,其比例为缓冲液9ml:NTG丙酮溶液lml,浓度为NTG 1mg/ml ;使用时取母液0.2ml + 菌悬液1.8ml,NTG终浓度为100ug/ ml.一般随菌种不同而异,细菌一般为100-1000 ug/ ml,放线菌、真菌为l000-3000 ug/ ml.③放线菌在生长适宜的温度下培养,(细菌30-35℃、真菌25-28℃、放线菌30-32℃)处理若干时间,一般细菌20-60min,孢子90-120 min④终止反应.冷的生理盐水50倍稀释处理,或经过离心洗涤处理,作一定稀释度分离于平皿.如果是细菌,把后培养基按一定浓度加入到菌体沉淀物中,振荡培养1.5-2h,经2-3次细胞分裂,再涂平皿. 处理完毕后,马上把接触过NTG的器皿用NaOH浸泡处理. NTG除以上直接以溶液处理外,还可以按以下方法诱变处理,摇瓶振荡处理:在接菌后的培养基中加人5-10 ug/ ml NTG.并加几滴吐温60或吐温80,使成乳化状(注意吐温对该菌生长是否有影响);在平皿上生长过程处理:如果将NTG、琼脂和菌体混合制成平板,NTG浓度为10-50 ug/ ml.或将琼脂培养基制成平板.然后将NTG和菌体混合涂抹平析,此时NTG浓度为10-20 ug/ ml. 经后培养的培养液.除部分进行平皿分离外.剩余的培养液可以加人适量的药物,保存于冰箱内数天.如日本有人把经过NTG处理后的大肠杆菌培养液,用50%甘油(最终浓度为12.5%)于-40℃、-80℃保存.在以后数天内随时可取出融化,稀释分离,突变体亡很少. 据报道.无论是用辐射处理,还是用化学诱变剂处理后的菌悬液或后增养液,浸在冰浴中2-3h,试验的重复性很好.认为在大肠杆菌、枯草杆菌和放线菌等可以采取这一措施来提高诱变效果. NTG是一种强烈致癌物质,操作时要带橡皮手套,穿工作服,带口罩,用称量瓶称量,最好在通风橱中进行.凡接触过NTG的器皿必须及时、单独处理,例用自来水大量冲洗或用1-2N的NaOH浸泡过夜,洗净. 2.甲基磺酸乙酯(简称EMS)甲基磺酸乙酯是磺酸酯类中诱变效果较好的一种烷基化合物,外观呈粉末状或无色液体,难溶于水,不稳定,易水解成无活性物质. EMS的诱变处理方法: ① EMS 母液的配制:为了安全和防上失效,配制前将需用的器皿,置冰箱内预冷,然后在冰浴中进行配制.取0.5ml EMS原液,加人到10 ml pH7.2磷酸缓冲液中,加盖,并轻轻转动试管.由于在水溶液中易失效,故尽可能低温保藏,并要现用现配. ②取新鲜的菌体,经前培养至对数期.离心洗涤,用缓冲液制成8 ml菌悬液(107-108ml-1).对于丝状菌孢子,则前培养至萌动期,悬液含 106 ml-1. ③取EMS母液2ml,加人到以8ml的菌悬液中.在适宜温度下处理一定时间(根据预实验绪果确定).处理的最终浓度为0 .lmol/L.对于真菌孢子,则为0.2-0.5rnol/L. ④EMS处理一定时间后,用50倍生理盐水稀释或加入一定量的2%NaS2O3溶液或多次离心、洗涤,以终止反应. EMS是剧毒的诱变剂,在整个诱变过程,包括配制药品、操作处理、保存等都要严守安全,不能接触皮肤,所有接触过EMS的器皿,单独用大量水冲洗洗涤,或用10%NaS2O3溶液浸泡过夜,再用清水冲洗干净. 三、脱氨剂亚硝酸是一稀常用的诱变剂,毒性小.不稳定,易挥发.其钠盐易在酸性缓冲液中产生NO和NO2 (一)亚硝酸的诱变机制脱去碱基中的氨基变成酮基,引起转换而发生变异.A→H,C→U,G→X. A:T→G:C和G:C→A:T.亚硝酸的诱变也可以发坐回复突变. 亚硝酸除了脱氨基作用外,还可引起DNA交联作用,DNA复制,从而导致奕变. (二)亚硝酸的处理方法 1.试剂的配制(1)1mol/L pH4.5醋酸缓冲液(2)0.1mol/L亚硝酸钠溶液(3)0.07mol/L pH8.6磷酸氢二钠溶液以上试剂用前均要灭菌. 2.处理方法取孢子悬液1 ml,pH4.5醋酸缓冲液2ml及硝酸钠溶液lml,最后处理浓度为0.025 mol/L ;25-26℃保温10-20min,加入的磷酸氢二钠溶液 20 ml,使出下降至pH 6. 8左右,以终止反应.稀释分离于平板. 如果是处理细菌,亚硝酸最后浓度以0.05 mol/L. 在亚硝酸处理菌体或孢子时要严格控制好温度,否则会影响诱变效果. 四、移码诱变剂移码诱变剂与DNA相互结合引起碱基增添或缺失而造成突变.它们主要包括吖啶黄、吖啶橙、ICR-171、ICR-191等.移码诱变剂对噬菌体有强烈的诱变作用,诱发细菌、放线菌的质粒脱落比其他诱变剂效果更为显著.如某些产生抗生素的放线菌.用处理后,发现产量明显下降,主要就是由于控制抗生素合成的质粒脱落造成的. 吖啶黄的性质和使用方法:淡**晶体,微溶于热水,溶于乙醇和,不稳定,见光易分解. 使用时,先用少许乙醇溶解,配成一定浓度的母液.通常处理方法是特它们加入培养基中,使最后浓度为10-50ug/ml,混合后制成平板,适温培养,在生长过程中处理.另外还可将吖啶黄加人到培养液中,浓度为10-20 ug/ml ,在适温条件下,振荡培养过程中处理. 五、羟化剂以羟胺为例羟胺的简称HA,常以盐酸羟胺形式存在,为白色晶体,溶于水,不稳定易分解,具腐蚀性. 1.羟胺的诱变机制当羟胺浓度为0.1-1.0mol/L pH6.0时,主要与胞嘧啶反应,使羟化的C与A配对,在0.1-1.0mol/L pH9.0,羟胺可以与鸟嘧啶反应,10-3 mol/L时,羟胺可以与胸腺嘧啶、鸟嘌呤和尿嘧啶起反应.但据分析,羟胺与T、G反应的是它的产物,而不是它本身.此外,羟胺有时还能和细胞中其他物质作用产生过氧化氯,也具有诱变作用. 2.羟胺的处理方法常用浓度为0.1%-5%,可直接在溶液中处理,时间1-2h,然后分离培养.但一般都加到琼脂平板或振荡培养基中.然后接入孢 子或细菌,在适温下培养,生长过程中处理.所用浓度比直接处理时低些. 六、金属盐类用于诱变育种的金属盐类主要有氯化锂、硫酸锰等.其中氯化理比较常用,与其他诱变剂复合处理,效果相当显著. 氯化锂称之为助诱变剂,氯化锂是白色粉末,易溶于水,使用时通常加到培养基中. 为了速免受破坏.倒平板时,当培养基温度冷却到50-60℃时才加入制成平板,然后把细菌或孢子涂布分离,处理终浓度为0.3%-1.5%. 七、其他化学诱变剂 1.秋水仙素秋水仙碱是诱发细胞染色休多倍体的诱变剂.秋水仙碱的主要作用是破坏细胞有丝分裂过程中纺锤丝的形成.导致多倍体的产生. 2.抗生素作为诱变剂的抗生素主要有链黑霉素、争光霉素、丝裂霉素、放线菌素、光辉霉素和阿霉素等.这些抗生素都是抗癌药物,它们在微生物育种中虽有应用,但效果不如烷化剂等诱变剂显著,应用并不广泛.一般不单独使用,常与其他诱变剂一起复合使用. 八、直视化学诱变剂的操作安全化学诱变剂多数是极毒的致癌药品,在进行诱变操作后的处置以及诱变剂的保藏等方面的安全防护都是极其重要的.如有疏忽,就可能对健康和环境带来恶果,万万不可麻痹.
大型焦虫病的治疗
(1)病因
是由焦虫(血孢子虫或梨形虫)寄生于羊的血细胞或血浆内而引起的血液原虫病。焦虫经草蜱在羊群中传播。
(2)症状
体温升高至41~42℃,呈稽留型热,呼吸浅表,心跳加快,精神沉郁,食欲减退以至废绝,黏膜苍白或发黄,体表淋巴结肿大,触之敏感;有时出现血红蛋白尿。
(3)防治
消灭草蜱(壁虱)。在草蜱活跃的季节(4~6月份),每周用0.5%~1%的敌百虫溶液或0.05~0.1%的赛福丁(畏丙)溶液刷拭羊体1次,15分钟草蜱可自行脱落。
治疗可选用以下方法:
第一,7%贝尼尔(血虫净),每千克体重5~7毫克或每只羊200~250毫克,先肌内注射1次,隔24小时再按上述剂量肌内注射1次,一般注射2次即可痊愈。切记,每次注射要严格间隔24小时,用此药时要高倍稀释为1%以下的浓度,必须进行肌内注射。由于刺激性,注后羊有痛感,是正常现象。一般瓶装为1克,先用10毫升注射水稀释,根据羊体重吸取用量后,为了减轻药的刺激作用,再用10毫升注射水作第二次稀释,然后才可用于注射。药液稀释后要当天用完。
第二,南方疟疾多发地区有磷酸博宁奎,每次每只肌内注射50~70毫克,2~3次即可痊愈。
第三,**素,每千克体重3~4毫克,用生理盐水稀释。
对于贫血严重极度衰弱的病牛,首先要注射强心剂,同时要进行输液或输血疗法。作为杀虫剂可选用下列药物①抗焦虫素(硫酸喹啉脲)注射液,每kg体重1mg,用生理盐水配成1%~2%的溶液作皮射。但注射后病牛可出现不安、呼吸加快、脉搏增数、流涎、肌肉震颤、大小便失禁等症状,严重的可以亡,多数在1~4h内恢复正常。如果配合注射硫酸阿托品,可预防或减轻副作用;②血虫净(贝尼尔),可每kg体重5~7mg,以注射用水配成5%溶液,臀深部肌肉注射,隔日1次,连用3次即可。③**素(盐酸吖啶黄)每kg体重3~4mg(一般每头牛最大剂量不超过2g),以生理盐水稀释成0.5%~1%的溶液静脉注射。必要时可隔1—2天后再注射1次。
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